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技術(shù)中心>SCIEX中國(guó)本土化產(chǎn)品Triple Quad 6500+質(zhì)譜系統(tǒng)檢測(cè)細(xì)胞中的能量代謝物

    

    

    

    

    

    SCIEX中國(guó)本土化產(chǎn)品Triple Quad 6500+質(zhì)譜系統(tǒng)檢測(cè)細(xì)胞中的能量代謝物
    

    
來(lái)源：SCIEX（愛(ài)博才思）      分類(lèi)：應(yīng)用方案

2025-03-28 13:15:13 22閱讀次數(shù)

    

    

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    本土化產(chǎn)品
    作為全球生命科學(xué)分析技術(shù)的創(chuàng)新者，在2024年10月30日宣布在中國(guó)本土化生產(chǎn) Triple Quad 6500+系統(tǒng)和QTRAP 6500+系統(tǒng)。這標(biāo)志著本土化戰(zhàn)略的又一個(gè)里程碑，自2023年在中國(guó)蘇州成功交付本土化 Triple Quad 4500系統(tǒng)、QTRAP 4500系統(tǒng)和 5500+系列質(zhì)譜以來(lái)， 6500+系列高端質(zhì)譜的2個(gè)型號(hào)也已經(jīng)實(shí)現(xiàn)中國(guó)本土生產(chǎn)。


    6500+系統(tǒng)是高端三重四極桿/QTRAP質(zhì)譜產(chǎn)品，在復(fù)雜基質(zhì)中能為不同類(lèi)型分子提供卓越的靈敏度。它為具有挑戰(zhàn)性的檢測(cè)設(shè)計(jì)，具備優(yōu)異的可靠性和穩(wěn)健性。其主要特點(diǎn)包括快速極性切換和多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）速度，可兼容更靈活的色譜方法并提高檢測(cè)通量。無(wú)論是利用四極桿功能還是線(xiàn)性離子阱QTRAP增強(qiáng)子離子掃描功能，都能為樣品的鑒別、表征和定量帶來(lái)新穎的發(fā)現(xiàn)。

    概述

    細(xì)胞能量代謝研究可借助于各種細(xì)胞模型, 鑒識(shí)細(xì)胞內(nèi)源性能量代謝物, 直接反映細(xì)胞生命活動(dòng)的生物標(biāo)志物信息, 從而揭示有關(guān)細(xì)胞的代謝途徑和過(guò)程, 對(duì)于體外研究藥物作用下代謝物的變化及改變機(jī)制具有重要意義。能量代謝物中包含很多高能磷酸鍵化合物如ATP，ADP等，在進(jìn)行液相質(zhì)譜分析時(shí)，容易與管路中的金屬離子絡(luò)合導(dǎo)致峰型變差，靈敏度降低。

    本文優(yōu)化了流動(dòng)相條件，通過(guò)加入亞甲基二膦酸來(lái)改善峰型，在本土化產(chǎn)品 Triple Quad 6500+系統(tǒng)上建立了300多種能量代謝物的檢測(cè)方法，可以進(jìn)行高通量靶向分析。


    實(shí)驗(yàn)條件

    液相方法
    流動(dòng)相：A: 90%水（含20mM乙酸銨，5μM亞甲基二膦酸）B: 90%乙腈（含20mM乙酸銨，5μM亞甲基二膦酸）
    流速：0.3 mL/min
    柱溫：40 ℃
    梯度洗脫：
    表1. 液相梯度條件
    時(shí)間
    (min)
    A%
    B%
    0
    0
    100
    1
    0
    100
    12
    25
    75
    15
    60
    40
    20
    60
    40
    20.1
    0
    100
    26
    0
    100

    質(zhì)譜方法
    數(shù)據(jù)采集方法：MRM（多反應(yīng)監(jiān)測(cè)）
    離子源：ESI源正模式/負(fù)模式

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    1. 化合物峰型好，靈敏度高。
    正離子模式下目標(biāo)化合物的提取離子流圖見(jiàn)圖1，負(fù)離子模式各目標(biāo)化合物的提取離子流圖見(jiàn)圖2。

    點(diǎn)擊查看大圖
    圖1.部分正模式化合物提取離子色譜圖

    點(diǎn)擊查看大圖
    圖2.部分負(fù)模式化合物提取離子色譜圖

    2. 數(shù)據(jù)分析
    實(shí)驗(yàn)共檢測(cè)了12個(gè)細(xì)胞樣品用于差異性分析，其中6個(gè)為給藥組細(xì)胞樣本，另外6個(gè)為對(duì)照組樣本。利用該方法對(duì)這批樣本中能量代謝物進(jìn)行了靶向的分析。為了找出變化差異明顯的能量代謝物成分，進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析，得到每種代謝物在兩組樣品中的p-value和VIP值，通過(guò)p-value< 0.01和VIP>1的篩選，共有92種代謝物有顯著變化。從熱圖（圖3）可以發(fā)現(xiàn)對(duì)照組與給藥組有顯著差異，在top25的化合物中，給藥組中腺苷、鳥(niǎo)苷、肌苷、尿嘧啶等14種物質(zhì)含量升高，脫氧鳥(niǎo)苷三磷酸、甘氨酸、肌醇、天門(mén)冬氨酸、肌氨酸等11種物質(zhì)含量降低。

    點(diǎn)擊查看大圖
    圖3. 兩組細(xì)胞樣品的熱圖（top25）
    （G為給藥組，C為對(duì)照組）

    方法特點(diǎn)及優(yōu)勢(shì)

    在本土化產(chǎn)品Triple Quad 6500+建立了330種能量代謝物L(fēng)C-MS/MS檢測(cè)方法，可用于細(xì)胞中能量代謝物的靶向研究。該方法不僅能高效準(zhǔn)確地檢測(cè)出樣品中的代謝物成分，而且能夠提供有效地差異性分析，為高通量分析不同模型下能量代謝物的差異提供了快速可靠的方法。本土產(chǎn)品Triple Quad? 6500+擁有跟進(jìn)口產(chǎn)品一樣的性能，整套系統(tǒng)具有非常強(qiáng)的抗基質(zhì)干擾能力，靈敏度高，進(jìn)而可以簡(jiǎn)化前處理的流程，且回收率滿(mǎn)足要求，儀器重復(fù)性好。

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    最近更新：2024-12-06 15:56:05
    

    
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