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    Human IL-21 ELISA Kit 人白介素21 ELISA檢測試劑盒

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    詳細(xì)介紹

     

    人白介素21 (Human IL-21)是一種I型細(xì)胞因子,調(diào)節(jié)T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞和髓細(xì)胞的功能。IL-21由活化的濾泡輔助性T細(xì)胞(Tfh)、Th17細(xì)胞和NKT細(xì)胞產(chǎn)生。Tfh衍生的IL-21通過其對Tfh細(xì)胞的自分泌作用和對免疫球蛋白成熟、漿細(xì)胞分化和記憶B細(xì)胞的旁分泌作用,在體液免疫的發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。成熟人IL-21具133個氨基酸與小鼠和大鼠IL-21分別具有63%和61%序列同一性。IL-21與癌癥免疫治療、病毒感染和過敏等臨床疾病有很大關(guān)系,也通過限制過敏原特異性IgE的產(chǎn)生和肥大細(xì)胞脫顆粒來抑制皮膚超敏反應(yīng)。

    翌圣Human IL-21 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、血漿中的人白介素21(Human IL-21)。特異性抗人白介素21抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的人白介素21與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入檢測抗體孵育結(jié)合,經(jīng)洗滌,再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中人白介素21的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。

     

    產(chǎn)品信息

    貨號

    97030ES48 / 97030ES96 

    規(guī)格

    48 T / 96 T

    檢測范圍

    15.63-1000 pg/mL

    檢測方法

    雙抗夾心法

    檢測物種

    檢測時長

    4.5小時

    靈敏度

    8.16 pg/mL

    稀釋線性

    81 - 117%

    回收率

    76 - 121%

    板內(nèi)差

    3.3%

    板間差

    5.0%

     

    實驗數(shù)據(jù)

    1. 標(biāo)曲數(shù)據(jù)

    1. 靈敏度檢測

    IL-21的最低檢測限為8.16 pg/mL,通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計算得出。

    1. 精密度檢測

    酶標(biāo)板內(nèi)精密度

    3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測定10次,評估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。

    酶標(biāo)板間精密度

    3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測30次,評估酶標(biāo)板間的精密度。

    項目

    板內(nèi)精密度

    板間精密度

    樣本

    1

    2

    3

    1

    2

    3

    10

    10

    10

    30

    30

    30

    平均值

    810.2

    282.4

    17.5

    818.2

    274.9

    16.6

    標(biāo)準(zhǔn)差

    21.1

    3.7

    1.1

    21.7

    7.2

    1.6

    變異系數(shù)%

    2.6

    1.3

    6.1

    2.7

    2.6

    9.8

    1. 回收率檢測

     通過不同水平的IL-21添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:

    樣本類型

    平均回收率(%)

    范圍(%)

    血清

    104.0

    94.5-119.4

    血漿

    85.5

    76.8-91.8

    細(xì)胞培養(yǎng)上清

    105.0

    82.8-121.8

    1. 稀釋線性檢測

    血清稀釋比例

    平均期望值(%)

    范圍(%)

    1:02

    104.7

    104.2-105.0

    1:04

    101.3

    100.1-101.9

    1:08

    112.5

    108.0-117.8

    1:16

    113.6

    112.3-114.9

     

    血漿稀釋比例

    平均期望值(%)

    范圍(%)

    1:02

    99.3

    97.1-101.3

    1:04

    93.9

    93.0-95.3

    1:08

    92.3

    90.6-93.1

    1:16

    87.0

    81.3-91.6

     

    細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例

    平均期望值(%)

    范圍(%)

    1:02

    109.6

    108.4-111.8

    1:04

    107.8

    107.3-108.1

    1:08

    105.9

    100.2-110.5

    1:16

    96.9

    93.3-100.0

    1. 樣本值

    應(yīng)用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。

    樣本類型

    樣本數(shù)目

    平均值(pg/mL)

    樣本值(pg/mL)

    血清

    10

    3.7

    n.d.-36.9

    血漿

    10

    2.2

    n.d.-21.7

    細(xì)胞培養(yǎng)上清

    6

    n.d.

    n.d.

    n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得15.63 pg/mL

    1. 測定特異性

    本試劑盒識別天然和重組人白介素21。下述因子進行了特異性的評估,沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。

    Recombinant human:

    Recombinant Mouse:

    Recombinant Rat:

    IFN-γ

    IL-10

    IFN-γ

    IFN-γ

    IL-1β

    IL-12

    IL-1β

    IL-1β

    IL-2

    IL-17

    IL-2

    IL-2

    IL-4

    IL-18

    IL-4

    IL-4

    IL-5

    IL-22

    IL-6

    IL-6

    IL-6

    MCP-1

    IL-10

    IL-10

    IL-8

    TNF-a

    TNF-a

    TNF-a

     

    檢測簡圖

     

    疑問解答

    問題

    造成原因

    解決方法

    標(biāo)曲不好

    移液量不準(zhǔn)確

    檢查移液器,按時校準(zhǔn),仔細(xì)操作,充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。

    稀釋方法不恰當(dāng)

    顯色值偏低

    孵育時間太短

    給予足夠的孵育時間,樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。

    移液量不足或稀釋不當(dāng)

    校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作

    CV偏高

    酶標(biāo)板清洗不當(dāng)

    使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機,檢查所有的端口是否堵塞。

    受污染的洗液

    準(zhǔn)備新鮮洗液

    靈敏度較低

    試劑盒儲存不當(dāng)

    按照產(chǎn)品組分表進行保存。

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