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    Human IL-10 ELISA Kit 人白介素10 ELISA檢測(cè)試劑盒

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    詳細(xì)介紹

     

    人白介素10 (Human IL-10),也稱為細(xì)胞因子合成抑制因子(CSIF),能夠抑制Th1細(xì)胞的激活和相關(guān)細(xì)胞因子(如IL-1β和 TNF-α)的產(chǎn)生。IL-10是一種178個(gè)氨基酸的分子,含有兩個(gè)鏈內(nèi)二硫鍵橋,并以36kDa的非共價(jià)相關(guān)同源二聚體的形式表達(dá)。成熟的人IL-10與牛、犬、馬、貓、小鼠、綿羊、豬和大鼠IL-10具有72%至86%的氨基酸序列同一性。IL-10可以靶向各種白細(xì)胞,減弱過(guò)度的免疫反應(yīng)。它影響單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞的三個(gè)重要功能:抗原呈遞、免疫介質(zhì)的釋放和吞噬作用,這也代表它抑制了單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞的所有功能。與IL-4、IL-5類似,IL-10也參與了自身免疫病的發(fā)展。如炎癥性腸?。↖BD)中可以觀察到IL-10 的存在;在慢性肝部炎癥中,IL-10起到了保護(hù)作用。

    翌圣Human IL-10 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒,用于定量測(cè)定血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中的IL-10。特異性抗IL-10抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本,經(jīng)過(guò)孵育,樣本中存在的IL-10與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入檢測(cè)抗體孵育結(jié)合,經(jīng)洗滌,再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中IL-10的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm 波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng)570 - 630 nm)測(cè)定吸光度值。

     

    產(chǎn)品信息

    貨號(hào)

    97063ES48 / 97063ES96 

    規(guī)格

    48 T / 96 T

    檢測(cè)范圍

    62.5-4000 pg/mL

    檢測(cè)方法

    雙抗夾心法

    檢測(cè)時(shí)長(zhǎng)

    4.5小時(shí)

    靈敏度

    27.5 pg/mL

    稀釋線性

    79 - 117%

    回收率

    80 - 118%

    板內(nèi)差

    5.9%

    板間差

    7.1%

     

    實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

    1. 標(biāo)曲數(shù)據(jù)

    數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,生成的標(biāo)曲用于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析。

    1. 靈敏度檢測(cè)

    IL-10的最低檢測(cè)限為27.5 pg/mL,通過(guò)使用重復(fù)檢測(cè)20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算得出。

    1. 精密度檢測(cè)

    酶標(biāo)板內(nèi)精密度

    3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測(cè)定6次,評(píng)估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。

    酶標(biāo)板間精密度

    3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測(cè)18次,評(píng)估酶標(biāo)板間的精密度。

    項(xiàng)目

    板內(nèi)精密度

    板間精密度

    樣本

    1

    2

    3

    1

    2

    3

    6

    6

    6

    18

    18

    18

    平均值

    2228.9

    545.8

    133.4

    2200.5

    537.4

    126.9

    標(biāo)準(zhǔn)差

    191.2

    18.6

    7.8

    193.7

    20.8

    11.0

    變異系數(shù)%

    8.6

    3.4

    5.8

    8.8

    3.9

    8.6

    1. 回收率檢測(cè)

     通過(guò)不同水平的IL-10添加于樣本中來(lái)測(cè)定回收率,其回收率如下:

    樣本類型

    平均回收率(%)

    范圍(%)

    血清

    89.3

    79.9-96.8

    血漿

    105

    85.5-115.1

    細(xì)胞培養(yǎng)上清

    106.3

    83.8-117.6

    1. 稀釋線性檢測(cè)

    血清稀釋比例

    平均期望值(%)

    范圍(%)

    1:02

    109.1

    100.9-117.3

    1:04

    99.6

    88.5-111

    1:08

    104.3

    98.7-114.5

    1:16

    100.3

    85.2-115.5

     

    血漿稀釋比例

    平均期望值(%)

    范圍(%)

    1:02

    97.8

    93.6-102.5

    1:04

    96.6

    90-101.3

    1:08

    93.0

    78.9-102.7

    1:16

    90.8

    81.4-97.3

     

    細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例

    平均期望值(%)

    范圍(%)

    1:02

    101.8

    98.3-104.4

    1:04

    89.2

    83.8-101.3

    1:08

    98.6

    85.1-113.7

    1:16

    89.8

    81.2-97.1

    1. 樣本值

    應(yīng)用本試劑盒,檢測(cè)若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。

    樣本類型

    樣本數(shù)目

    平均值(pg/mL)

    樣本值(pg/mL)

    血清

    4

    n.d.

    n.d.

    血漿

    8

    n.d.

    n.d.

    細(xì)胞培養(yǎng)上清

    6

    n.d.

    n.d.

    n.d. 指樣本濃度值低于檢測(cè)范圍內(nèi)得62.5 pg/mL

    1. 測(cè)定特異性

    本試劑盒識(shí)別天然和重組IL-10,沒(méi)有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。

    Recombinant  human:

    Recombinant  Mouse:

    Recombinant  Rat:

    IL- 1β

    IL-17A

    IL-1β

    IL-1β

    IL-2

    IL-21

    IL-2

    IL-2

    IL-4

    IL-22

    IL-4

    IL-4

    IL-5

    IL-23

    IL-6

    IL-6

    IL-6

    TNF-α

    IL- 10

    IL- 10

    IL-8

     

    IL- 17A

    IL- 17A

    IL-12

     

    TNF-α

    TNF-α

     

    檢測(cè)簡(jiǎn)圖

     

    疑問(wèn)解答

    問(wèn)題

    造成原因

    解決方法

    標(biāo)曲不好

    移液量不準(zhǔn)確

    檢查移液器,按時(shí)校準(zhǔn),仔細(xì)操作,充分混勻時(shí)蓋緊管口并盡量避免泡沫。

    稀釋方法不恰當(dāng)

    顯色值偏低

    孵育時(shí)間太短

    給予足夠的孵育時(shí)間,樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。

    移液量不足或稀釋不當(dāng)

    校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作

    CV偏高

    酶標(biāo)板清洗不當(dāng)

    使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機(jī),檢查所有的端口是否堵塞。

    受污染的洗液

    準(zhǔn)備新鮮洗液

    靈敏度較低

    試劑盒儲(chǔ)存不當(dāng)

    按照產(chǎn)品組分表進(jìn)行保存。

     

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