Hieff NGS? dsDNA Methyl Library Prep Kit for Illumina?

Hieff NGS^® dsDNA Methyl Library Prep Kit for Illumina^®是針對Illumina^®高通量測序平臺開發(fā)的雙鏈DNA甲基化建庫試劑盒。本試劑盒通過連接相應的甲基化接頭，經(jīng)亞硫酸氫鹽或酶法轉化處理，再經(jīng)過一步擴增即可構建針對Illumina^®平臺測序的甲基化文庫。試劑盒所有組分均通過質(zhì)量控制和功能驗證，以確保文庫的穩(wěn)定產(chǎn)出，支持多種類型DNA樣本，包括gDNA、cfDNA和FFPE等。本試劑盒推薦的樣本起始量為10 ng-1000 ng DNA，并兼容市面主流的轉化方案。

組分信息

儲存條件

-25~-15℃保存，有效期1年。

使用方法

一、自備材料

1. 純化磁珠：Cat#12601，Hieff NGS^® DNA Selection Beads或Cat#A63880，AMPure XP Beads或其他等效產(chǎn)品。
2. 轉化模塊：Cat#12222，Hieff^® DNA Bisulfite Conversion Kit；Cat#12223，Hieff^® Mag DNA Methylation Bisulfite Kit和酶轉化模塊Cat#12213，Hieff^® DNA Mild methyl- Conversion Kit或其他等效產(chǎn)品。
3. DNA質(zhì)控：Agilent Technologies 2100 Bioanalyzer或其他等效產(chǎn)品。
4. 其他材料：無水乙醇、滅菌超純水、TE Buffer (10 mM Tris-HCl，pH 8.0-8.5+1 mM EDTA)、低吸附EP管、PCR管、磁

力架、PCR儀等。

二、操作流程

 圖1 Hieff NGS^® dsDNA Methyl Library Prep Kit for Illumina^®

  圖2 文庫片段分布示例

注：10 ng cfDNA使用Hieff NGS^® dsDNA Methyl Library Prep Kit for Illumina^®建庫后的文庫片段分布 (Agilent 2100,DNA 1000 Kit)，其中紅色代表酶轉化方案構建的DNA文庫，PCR擴增循環(huán)數(shù)為10；藍色代表重亞硫酸鹽轉化方案構建的DNA文庫，PCR 擴增循環(huán)數(shù)為 12。