Cebrary? Ovarian cancer Organoid Growth Medium (Human)卵巢癌類器官生長培養(yǎng)基?

Cebrary^® Ovarian Cancer Organoid Growth Medium 卵巢癌類器官生長培養(yǎng)基是一種無血清可應(yīng)用于細胞或組織來源的卵巢癌類器官的建立和長期培養(yǎng)過程，在細胞外基質(zhì)存在的條件下，培養(yǎng)基所含特有組分及豐富的細胞因子能促使卵巢癌細胞迅速生長成并形成卵巢癌類器官，類器官形成過程平穩(wěn)且迅速，同時保持較高的卵巢癌細胞特性和活力，為后續(xù)基于卵巢癌類器官的生理功能、疾病研究和精準醫(yī)學提供支持。

產(chǎn)品組分

運輸與保存方法

-25℃ ~ -15℃儲存，有效期1年；2-8℃儲存，有效期1月。

產(chǎn)品應(yīng)用

無菌操作條件下配制卵巢癌類器官完全培養(yǎng)基。以下是準備100 mL完全培養(yǎng)基操作流程，如所需量不同，可相應(yīng)調(diào)整用量。

1. 將營養(yǎng)組分1室溫解凍或者2-8℃過夜緩融。避免反復(fù)凍融，現(xiàn)配現(xiàn)融；

2. 將基礎(chǔ)培養(yǎng)基90 mL冰箱取出恢復(fù)至室溫；

3. 將10 mL營養(yǎng)組分1加入到基礎(chǔ)培養(yǎng)基內(nèi)，均勻混合；如暫不使用，短時2-8℃儲存。

4. 使用時可加入1%雙抗使用。

人源卵巢癌原代培養(yǎng)

1. 取材：標本離體后，盡快取材。采用無菌器械，保證無菌環(huán)境，將腫瘤組織放入含有5 mL的原代組織保存液的 15 mL 離心管中，4℃轉(zhuǎn)運。
2. 清洗：在生物安全柜中取出樣品管，去除組織保存液，加入適量冷的添加有雙抗的 PBS，反復(fù)清洗后，去除 PBS。
3. 重復(fù)清洗：重復(fù)第 2 步驟 3 次。
4. 組織處理：去除 PBS緩沖液后，將組織塊移至 10 cm 含 10 mL 冷原代 組織保存液的無菌培養(yǎng)皿中，用無菌眼科顯微剪將組織剪碎（直徑約 0.5mm-1mm）。
5. 重復(fù)清洗：使用常溫 PBS，重復(fù)第 2 步驟 3 次。
6. 收集組織碎片，加入組織消化液消化20-30 min，過70 um篩網(wǎng)，收集卵巢癌細胞。
7. 紅細胞裂解：加入 10 mL 紅細胞裂解緩沖液，室溫下在翹板搖床上搖10min。
8. 重復(fù)清洗：裂解完畢，使用常溫 DMEM/F12，重復(fù)第 2 步驟 3 次。
9. 類器官種板：調(diào)整細胞密度為2~3×10⁶，與基質(zhì)膠1：1均勻混合，將細胞混懸液以40-60ul每孔種在24孔板中，37℃放置15-30 min，加入預(yù)熱的類器官培養(yǎng)液，每個孔 750 uL。
10. 類器官培養(yǎng)：將培養(yǎng)板放在 37℃ CO₂ 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 每2天更換培養(yǎng)液。加入培養(yǎng)液時，吸頭朝向側(cè)壁，緩慢加入。
11. 類器官觀察：每天觀察類器官并拍照，了解初始類器官數(shù)量、增殖速 度、形態(tài)、微生物污染情況等。

注意事項

1. 產(chǎn)品的分裝、使用等操作需在無菌環(huán)境下進行。

2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

3. 本產(chǎn)品僅供科研使用，禁止用于人體。

Ver.CN 20230417