Cebrary? Liver Cancer Organoid Growth Medium (Human)肝癌類器官生長培養(yǎng)基

Cebrary^® Liver Cancer Organoid Growth Medium 肝癌類器官生長培養(yǎng)基是一種無血清可應(yīng)用于細(xì)胞或組織來源的肝癌類器官的建立和長期培養(yǎng)過程，在細(xì)胞外基質(zhì)存在的條件下，培養(yǎng)基所含特有組分及豐富的細(xì)胞因子能促使肝癌細(xì)胞迅速生長成并形成肝癌類器官，類器官形成過程平穩(wěn)且迅速，同時(shí)保持較高的肝癌細(xì)胞特性和活力，為后續(xù)基于肝癌類器官的生理功能、疾病研究和精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)提供支持。

產(chǎn)品組分

運(yùn)輸與保存方法

干冰運(yùn)輸。-20℃儲存，有效期1年；2-8℃儲存，有效期1月。

產(chǎn)品應(yīng)用

無菌操作條件下配制肝癌類器官完全培養(yǎng)基。以下是準(zhǔn)備100 mL完全培養(yǎng)基操作流程，如所需量不同，可相應(yīng)調(diào)整用量。

1. 將營養(yǎng)組分1室溫解凍或者2-8℃過夜緩融。避免反復(fù)凍融，現(xiàn)配現(xiàn)融；

2. 將基礎(chǔ)培養(yǎng)基90 mL冰箱取出恢復(fù)至室溫；

3. 將10 mL營養(yǎng)組分1加入到基礎(chǔ)培養(yǎng)基內(nèi)，均勻混合；如暫不使用，短時(shí)2-8℃儲存。

4. 使用時(shí)可加入1%雙抗使用。

人源肝癌原代培養(yǎng)

1.取材：標(biāo)本離體后，盡快取材。采用無菌器械，保證無菌環(huán)境，將腫瘤組織放入含有5 mL的原代組織保存液的 15 mL 離心管中，4℃轉(zhuǎn)運(yùn)。

2. 清洗：在生物安全柜中取出樣品管，去除組織保存液，加入適量冷的添加有雙抗的 PBS，反復(fù)清洗后，去除 PBS。 

3.重復(fù)清洗：重復(fù)第 2 步驟 3 次。 

4.組織處理：去除 PBS緩沖液后，將組織塊移至 10 cm 含 10 mL 冷原代 組織保存液的無菌培養(yǎng)皿中，用無菌眼科顯微剪將組織剪碎（直徑約 0.5mm-1mm）。 

5.重復(fù)清洗：使用常溫 PBS，重復(fù)第 2 步驟 3 次。

6.收集組織碎片，加入組織消化液消化20-30 min，過70 um篩網(wǎng)，收集肝癌細(xì)胞。 

7.紅細(xì)胞裂解：加入 10 mL 紅細(xì)胞裂解緩沖液，室溫下在翹板搖床上搖10min。 

8.重復(fù)清洗：裂解完畢，使用常溫 DMEM/F12，重復(fù)第 2 步驟 3 次。 

9.類器官種板：調(diào)整細(xì)胞密度為2~3×10⁶，與基質(zhì)膠1：1均勻混合，將細(xì)胞混懸液以40-60ul每孔種在24孔板中，37℃放置15-30 min，加入預(yù)熱的類器官培養(yǎng)液，每個(gè)孔 750 uL。 

10.類器官培養(yǎng)：將培養(yǎng)板放在 37℃ CO₂ 培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 每 2 天更換培養(yǎng)液。加入培養(yǎng)液時(shí)，吸頭朝向側(cè)壁，緩慢加入。 

11.類器官觀察：每天觀察類器官并拍照，了解初始類器官數(shù)量、增殖速 度、形態(tài)、微生物污染情況等。 

注意事項(xiàng)

1. 產(chǎn)品的分裝、使用等操作需在無菌環(huán)境下進(jìn)行。

2. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

3. 本產(chǎn)品僅供科研使用，禁止用于人體。

HB230307