動(dòng)物產(chǎn)品中馬、驢、騾源性成分的定性檢測方法 實(shí)時(shí)熒光PCR法
熒光定量PCR技術(shù)
在PCR指數(shù)擴(kuò)增期間通過連續(xù)監(jiān)測熒光信號(hào)強(qiáng)弱的變化來即時(shí)測定特異性產(chǎn)物的量,并據(jù)此推斷目的基因的初始量,不需要取出PCR產(chǎn)物進(jìn)行分離。
一、規(guī)范性引用文件
《GB/T 6682 分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法》、《GB/T 27403 實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品分子生物學(xué)檢測》、《SN/T 1193 基因檢測實(shí)驗(yàn)室技術(shù)要求》
二、儀器和設(shè)備
1、電子天平,感量0.01 g。
2、微量可調(diào)移液器(量程為10 μL、20 μL、100 μL、1 000 μL)。
3、恒溫水浴鍋。
4、磁力攪拌器。
5、高速冷凍離心機(jī)。
6、二級(jí)生物安全柜。
7、高壓滅菌鍋。
8、普通冰箱:4 ℃,-20 ℃。
9、pH計(jì)。
10、核酸蛋白分析儀或紫外分光光度計(jì)。
11、實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。
三、試劑和材料
試劑的配制及試驗(yàn)中的操作規(guī)范應(yīng)按GB/T 27403和SN/T 1193的規(guī)定執(zhí)行。
除另有規(guī)定外,試劑應(yīng)為分析純或化學(xué)純級(jí)別,實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T 6682的要求。所有試劑均用無DNA酶污染的容器分裝。
檢測用引物和Taqman探針序列(詳見表1)。
標(biāo)簽:動(dòng)物產(chǎn)品 源性成分 定性檢測 實(shí)時(shí)熒光PCR法
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