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2025-01-21 09:31:07可可脂固體脂: 可可脂固體脂是從可可豆中提取的天然脂肪，具有熔點(diǎn)高、穩(wěn)定性好等獨(dú)特性質(zhì)。它在常溫下呈固體狀態(tài)，能夠賦予巧克力等食品絲滑的口感和光澤的外觀。可可脂固體脂還是食品工業(yè)中的重要原料，廣泛應(yīng)用于糖果、糕點(diǎn)等產(chǎn)品的制作中。您是否有其他關(guān)于科學(xué)儀器的問題或需求？

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可可脂固體脂肪含量測(cè)試(間接法)

蘇州紐邁分析儀器 378
2022-02-11
可可脂固體脂固體脂肪含量脂肪含量測(cè)試

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可可脂固體脂問答

2022-02-11 12:03:04可可脂固體脂肪含量測(cè)試(間接法): 可可脂固體脂肪含量測(cè)試(間接法)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簻y(cè)試可可脂樣品在不同溫度下的固體脂肪含量；【本實(shí)驗(yàn)使用間接法測(cè)量SFC，也可使用直接法完成測(cè)試】實(shí)驗(yàn)材料種可可脂樣品，甘油；實(shí)驗(yàn)儀器PQ001固體脂肪含量測(cè)試儀，線圈直徑10mm，磁體溫度為40℃，烘箱，水浴鍋；樣品制備將可可脂放入烘箱內(nèi)融化成液體，再用移液管移取適量可可脂及甘油樣品到樣品管內(nèi)；實(shí)驗(yàn)方法1、可可脂樣品移入烘箱，設(shè)置溫度80oC: 恒溫15分鐘；2、可可脂樣品、標(biāo)準(zhǔn)樣品移入水浴，設(shè)置溫度60oC: 恒溫30分鐘；3、60度恒溫完成后，分別測(cè)試70us處液相可可脂樣品的信號(hào)為S60；標(biāo)準(zhǔn)樣品的信號(hào)為R60；4、可可脂樣品移入水浴，0oC: 恒溫90±2分鐘；5、可可脂樣品移入水浴，26oC: 恒溫40±0.5小時(shí)；6、可可脂樣品移入水浴，0oC: 恒溫90±2分鐘；7、測(cè)試8個(gè)溫度點(diǎn)對(duì)應(yīng)的固體脂肪含量，分別對(duì)應(yīng)：5℃，恒溫60±1分鐘；10℃，恒溫60±1分鐘；15℃，恒溫60±1分鐘；20℃，恒溫60±1分鐘；25℃，恒溫60±1分鐘；30℃，恒溫60±1分鐘；35℃，恒溫60±1分鐘；40℃，恒溫60±1分鐘；分別測(cè)得可可脂樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品對(duì)應(yīng)溫度下，70us處的核磁信號(hào)，ST、RT；對(duì)應(yīng)的固體脂肪含量可通過(guò)以下公式計(jì)算得到：SFC(T)=100-(R60×ST×100)/(S60×RT)SFC(T) 為對(duì)應(yīng)溫度T下的固體脂肪含量; S60為60度恒溫后，70us處測(cè)得液相可可脂樣品的信號(hào)；R60為60度恒溫后，70us處測(cè)得標(biāo)準(zhǔn)樣品的信號(hào)；ST為可可脂樣品在溫度T下70us處的信號(hào)；RT為標(biāo)準(zhǔn)樣品在溫度T下70us處的信號(hào)；固體脂肪含量測(cè)試結(jié)果圖

2023-05-25 16:47:05【ALP-TS-23008A】脂質(zhì)納米粒制備及表征解決方案: 全文共3826字，閱讀大約需要12分鐘脂質(zhì)納米粒簡(jiǎn)介脂質(zhì)納米粒(Lipid Nanoparticle，LNP)是一種粒徑介于 10-1000 nm 的新型藥物遞送載體，由多種有機(jī)材料、無(wú)機(jī)材料、金屬 - 有機(jī)框架或這些材料組合而成，可作為化學(xué)與生物制劑之間傳遞的媒介，脂質(zhì)納米粒包裹藥物可顯著提高藥物的穩(wěn)定性與生物利用度。[1]目前脂質(zhì)納米粒廣泛應(yīng)用于mRNA疫苗遞送、腫瘤治療、抗炎和抗感染藥物載體、治療神經(jīng)退行性疾病、抗瘧等領(lǐng)域。脂質(zhì)脂質(zhì)納米?？煞譃楣腆w脂質(zhì)脂質(zhì)納米粒(Solid Lipid Nanoparticles，SLN)和納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體(Nanostructured Lipid Carriers，NLC)。固體脂質(zhì)脂質(zhì)納米粒（SLN）主要是由固體脂質(zhì)、表面活性劑、有效成分和水制備的膠體顆粒，具有生物相容性好、有機(jī)溶劑使用少、體內(nèi)穩(wěn)定性高、應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)。但在儲(chǔ)藏過(guò)程中仍存在載藥量低、易凝膠化和藥物泄漏等問題；為此，研發(fā)人員嘗試在固體脂質(zhì)壁材中加入一定量的液體油脂，打亂了原來(lái)單純固體脂質(zhì)壁材的有序的晶體結(jié)構(gòu)，負(fù)載活性成分的量得到了提高，也使得晶體結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，不易發(fā)生泄露等現(xiàn)象。[2-3]圖1 LNP的結(jié)構(gòu)[3]脂質(zhì)納米粒靶向性研究是藥物遞送熱點(diǎn)研究方向之一，考慮到納米藥物自身性質(zhì)的影響，可通過(guò)對(duì)其自身物理化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行調(diào)控，如粒徑、表面電荷、表面修飾物等，以此來(lái)增加脂質(zhì)納米粒藥物的滲透作用。目前還開發(fā)了各種粒徑可調(diào)控的納米遞藥系統(tǒng)，Li 等[4，5]構(gòu)建了一種酸刺激響應(yīng)型脂質(zhì)納米粒，可以在低 pH 條件下將其粒徑從 100 nm 縮減到5 nm。脂質(zhì)納米粒的初始尺寸有利于長(zhǎng)時(shí)間的血液循環(huán)，當(dāng)?shù)竭_(dá)腫瘤部位后，酸性環(huán)境刺激脂質(zhì)納米粒發(fā)生結(jié)構(gòu)變化，粒徑縮小，有助于脂質(zhì)納米粒外滲和組織滲透。除 pH 響應(yīng)外，腫瘤組織處特異的酶環(huán)境、腫瘤細(xì)胞內(nèi)的還原環(huán)境和光、熱、磁等外部刺激都可以用于調(diào)控納米藥物的粒徑和表面電荷。[5]除平均粒徑外，脂質(zhì)納米粒的尾端大顆粒和過(guò)小顆粒也會(huì)影響納米藥物的效果，尾端大顆粒容易造成脂質(zhì)納米粒聚集，影響藥物的穩(wěn)定性和安全性，小顆粒（＜5nm）會(huì)被直接臟快速地過(guò)濾清除，影響藥物的有效性。過(guò)濾可有效減少脂質(zhì)納米粒藥物中的大顆粒和雜質(zhì)，提高脂質(zhì)納米粒藥物的穩(wěn)定性。Alpharmaca奧法美嘉平臺(tái)提供整套的脂質(zhì)納米粒均一性和穩(wěn)定性的解決方案，可用于快速評(píng)估、優(yōu)化脂質(zhì)納米粒的配方和工藝：高壓微射流均質(zhì)機(jī)、微流控技術(shù)對(duì)脂質(zhì)納米粒進(jìn)行均質(zhì)乳化分散處理、Nicomp粒度分析儀分析平均粒徑、AccuSizer顆粒計(jì)數(shù)器分析大粒子濃度，Lum穩(wěn)定性分析儀快速分析脂質(zhì)納米粒藥物穩(wěn)定性，Entegris-ANOW濾芯過(guò)濾雜質(zhì)及大顆粒。脂質(zhì)納米粒的制備技術(shù)傳統(tǒng)的脂質(zhì)納米粒制備技術(shù)，包括乙醇注入法、薄膜分散法、逆向蒸發(fā)法、凍融法等，存在粒徑分布廣和批間重復(fù)性大等問題，對(duì)藥物開發(fā)的臨床試驗(yàn)和生產(chǎn)具有很大的影響。為了解決傳統(tǒng)制備方法的弊端，微流控混合技術(shù)、高壓微射流技術(shù)、高壓均質(zhì)等新型制備技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生。高壓微射流制備方法：制備水相、油相，經(jīng)過(guò)混合、剪切步驟形成初乳，初乳經(jīng)微射流均質(zhì)機(jī)均質(zhì)，而后除菌過(guò)濾得到脂質(zhì)納米粒。微流控混合技術(shù)制備方法：制備水相、油相，將水相油相經(jīng)過(guò)微流控均質(zhì)乳化后，除菌過(guò)濾得到脂質(zhì)納米粒。無(wú)論是通過(guò)何種方法制備脂質(zhì)納米粒藥物，后續(xù)都需要對(duì)其平均粒徑、尾端大顆粒、穩(wěn)定性進(jìn)行檢測(cè)來(lái)篩選配方，PSS的Nicomp粒度分析儀可用于測(cè)試平均粒徑、AccuSizer顆粒計(jì)數(shù)器可用于測(cè)試大顆粒濃度、Lum穩(wěn)定性分析儀可用于快速篩選在不同工藝制備下脂質(zhì)納米粒藥物的穩(wěn)定性。圖2 高壓微射流法制備脂質(zhì)納米粒圖3 微流控混合技術(shù)法制備脂質(zhì)納米粒脂質(zhì)納米粒的粒徑控制脂質(zhì)納米粒的粒徑與其靶向性和有效性緊密相關(guān)，粒徑小且分布窄是脂質(zhì)納米粒藥物的理想粒徑。微流控技術(shù)通過(guò)微米通道控制流體的流動(dòng)和混合，具有良好的單分散性、可控性及重現(xiàn)性，可改善脂質(zhì)納米粒的均一性和藥物包封效率，并實(shí)現(xiàn)高通量生產(chǎn)，已成功應(yīng)用于Covid-19 mRNA 疫苗的制備[6]。高壓微射流均質(zhì)技術(shù)使物料在高壓作用下以高速度流經(jīng)腔體，經(jīng)過(guò)剪切、碰撞、空穴效應(yīng)等物理作用降低脂質(zhì)納米粒的平均粒徑，可對(duì)脂質(zhì)納米粒初乳進(jìn)一步均質(zhì)分散。高壓微射流均質(zhì)機(jī)PSI-20高壓微射流均質(zhì)機(jī)（小試兼中試型）采用固定結(jié)構(gòu)的均質(zhì)腔，通過(guò)電液傳動(dòng)的增壓器使物料在高壓作用下以極大的速度流經(jīng)交互容腔的微管通道，物料流在此過(guò)程中受到高剪切力、高碰撞力、空穴效應(yīng)等物理作用，使得平均粒徑降低、體系均一穩(wěn)定，由此獲得理想的均質(zhì)、分散、去團(tuán)聚的結(jié)果。圖4 PSI高壓微射流均質(zhì)機(jī)最高2069 bar的均質(zhì)壓力，最高處理量20L/h（PSI-20）采用特殊設(shè)計(jì)Y型腔，去除尾端大顆粒效果佳，物料的混合更均一，處理效率高。屏顯界面，數(shù)據(jù)可溯源：支持?jǐn)?shù)據(jù)導(dǎo)出設(shè)定壓力及實(shí)時(shí)壓力、監(jiān)測(cè)點(diǎn)溫度、實(shí)時(shí)流量、時(shí)間等。配置K型熱電偶：可用于實(shí)施監(jiān)測(cè)料液溫度。低噪音：運(yùn)行音量低于70分貝，工作環(huán)境友好型。NanoSpirit 系列微流控藥物制劑遞送平臺(tái)微流控制備系統(tǒng)通過(guò)制造泵和高壓輸送泵與微流控芯片連接。A相和B相可以按一定比例以恒定速度混合和乳化。在微流控芯片中，設(shè)計(jì)不同的流道結(jié)構(gòu)，控制不同的速度，使樣品在微流控芯片中湍流、層流或霧化，可以滿足預(yù)乳化或再乳化的要求。還可以將制備好的樣品通過(guò)高壓泵輸送到高壓微流控芯片中，通過(guò)沖擊力和剪切力控制粒徑，達(dá)到達(dá)到所需的包封率、粒徑、粒徑分布均一性等要求。圖5 NanoSpirit 系列高精度流量控制（＜5‰）。可提供多項(xiàng)可調(diào)參數(shù)（反應(yīng)量、流速等）。多型號(hào)微流芯片通用，適合多種載體類型。注射器規(guī)格：0.25，1，2.5，5，10 ml。自動(dòng)充液、反應(yīng)、前后排廢、清洗等工能平均粒徑與Zeta電位檢測(cè)脂質(zhì)納米粒徑不同使藥物富集在不同部位可現(xiàn)不同治療效果。應(yīng)用于腫瘤治療領(lǐng)域的脂質(zhì)納米粒，由于腫瘤組織處血管豐富，血管壁間隙較寬且結(jié)構(gòu)完整性差，具有適宜尺寸的脂質(zhì)納米粒（60-200 nm）可通過(guò) EPR 效應(yīng)在腫瘤處積聚，實(shí)現(xiàn)納米藥物的被動(dòng)靶向。脂質(zhì)納米粒電性一般呈中性或輕微負(fù)電性，在血液循環(huán)中，高正電性的脂質(zhì)納米粒會(huì)吸附蛋白質(zhì)，被迅速清除，進(jìn)而影響脂質(zhì)納米粒的藥代動(dòng)力學(xué)和生物分布。相比之下，中性脂質(zhì)納米粒以及帶有輕微負(fù)電荷的脂質(zhì)納米粒則顯示出延長(zhǎng)的半衰期。Zeta電位是衡量藥物穩(wěn)定性指標(biāo)之一，Zeta電位的絕對(duì)值越高，體系越穩(wěn)定。Nicomp納米激光粒度儀系列Nicomp系列納米激光粒度儀采用動(dòng)態(tài)光散射原理檢測(cè)分析樣品的粒度分布，基于多普勒電泳光散射原理檢測(cè)ZETA電位。圖6 Nicomp 3000系列粒徑檢測(cè)范圍0.3nm-10μm，ZETA電位檢測(cè)范圍為+/-500mV搭載Nicomp多峰算法，可以實(shí)時(shí)切換成多峰分布觀察各部分的粒徑。高分辨率的納米檢測(cè)，Nicomp納米激光粒度儀對(duì)于小于10nm的粒子仍然顯示較好的分辨率和準(zhǔn)確度。圖7 高斯粒徑分布圖圖8 多峰粒徑分布圖顆粒分布檢測(cè)尾端大顆粒的存在會(huì)影響藥物本身的穩(wěn)定性，由于表面積增大，使得體系形成熱力學(xué)不穩(wěn)定體系，容易發(fā)生脂質(zhì)納米粒聚集以降低體系自由能現(xiàn)象。尾端大顆粒的存在還會(huì)對(duì)身體機(jī)能造成影響，較大的顆粒（> 200 nm）容易積聚在肝臟和脾臟中，影響藥物安全性；粒徑極?。? 5 nm）的顆粒則會(huì)被腎臟快速地過(guò)濾清除，影響藥物的有效性。AccuSizer顆粒計(jì)數(shù)器系列AccuSizer系列在檢測(cè)液體中顆粒數(shù)量的同時(shí)精確檢測(cè)顆粒的粒度及粒度分布，通過(guò)搭配不同傳感器、進(jìn)樣器，適配不同的樣本的測(cè)試需求，能快速而準(zhǔn)確地測(cè)量顆粒粒徑以及顆粒數(shù)量/濃度。圖9 AccuSizer系列檢測(cè)范圍為0.5μm-400μm（可將下限拓展至0.15μm）。0.01μm的超高分辨率，AccuSizer系列具有1024個(gè)數(shù)據(jù)通道，能反映復(fù)雜樣品的細(xì)微差異，為研發(fā)及品控保駕護(hù)航。靈敏度高達(dá)10PPT級(jí)別，即使只有微量的顆粒通過(guò)傳感器，也可以精準(zhǔn)檢測(cè)出來(lái)?？沙鼍叻ㄒ?guī)報(bào)告LumiSpoc單粒子顆粒計(jì)數(shù)器LumiSpoc采用單粒子光散射技術(shù)（SPLS），通過(guò)在光學(xué)流通池中進(jìn)行流體動(dòng)力聚焦，將單個(gè)粒子排列成一條直線。通過(guò)調(diào)整流動(dòng)條件來(lái)調(diào)整樣品濃度，從而避免濃度峰值的影響。當(dāng)單個(gè)納米或者微米顆粒經(jīng)過(guò)特殊光束截面的激光束時(shí)，記錄其正向和側(cè)向散射的光強(qiáng)。根據(jù)米氏理論，將分類強(qiáng)度轉(zhuǎn)換為粒度分布密度。通過(guò)軟件分析顯示計(jì)數(shù)分布、顆粒濃度。在行業(yè)內(nèi)已有使用Lumispoc用于顆粒濃度的監(jiān)測(cè)成功案例。圖10 LumiSpoc單粒子顆粒計(jì)數(shù)器顆粒粒徑檢測(cè)范圍：50 nm ~ 8 μm（取決于樣品）顆粒濃度檢測(cè)范圍：1 × 106 ml-1 ~ 1 × 109 ml-1進(jìn)樣體積：250 μl穩(wěn)定性分析檢測(cè)穩(wěn)定性是評(píng)價(jià)藥物制劑質(zhì)量的重要指標(biāo)之一，也是確定藥物制劑使用期限的主要依據(jù)。藥物制劑若發(fā)生分解、變質(zhì)，可導(dǎo)致藥效降低，甚至產(chǎn)生或增加毒副作用，危及患者的身體健康和生命安全，Zeta電位、尾端大顆粒濃度都是衡量藥物穩(wěn)定性的指標(biāo)之一。除此之外，還可以使用穩(wěn)定性分析儀測(cè)量樣品的分離、沉降、懸浮或澄清、浮離、聚集、凝聚或產(chǎn)品存放期以及粒徑分布。LUM穩(wěn)定性分析儀Lum穩(wěn)定性分析儀可以直接測(cè)量整個(gè)樣品的分散體的穩(wěn)定性，檢測(cè)和區(qū)分各種不穩(wěn)定現(xiàn)象，如上浮、絮凝、聚集、聚結(jié)、沉降等，通過(guò)測(cè)量結(jié)果可用來(lái)開發(fā)新的配方和優(yōu)化現(xiàn)有的配方及工藝。圖11 LUM穩(wěn)定性分析儀快速、直接測(cè)試穩(wěn)定性，無(wú)需稀釋，溫度范圍寬廣可同時(shí)測(cè)8個(gè)樣品，測(cè)量及辨別不同的不穩(wěn)定現(xiàn)象及不穩(wěn)定性指數(shù)加速離心，最高等效2300倍重力加速度過(guò)濾經(jīng)高壓微射流均質(zhì)機(jī)或微流控技術(shù)處理的脂質(zhì)納米粒，還需進(jìn)行適當(dāng)?shù)倪^(guò)濾工藝，用于去除脂質(zhì)納米粒藥物中的尾端大顆粒和雜質(zhì)，提高藥物的穩(wěn)定性和安全性。濾膜的材質(zhì)和型號(hào)將影響脂質(zhì)納米粒藥物的過(guò)濾效率和效果，綜合考慮膜與納米藥物配方的兼容性、成本、效率等多方面因素選擇合適的濾膜。Entegris濾芯Entegris-Anow是一家高分子微孔膜過(guò)濾企業(yè)，專業(yè)從事MCE、Nylon、PES、PVDF、PTFE等（膜孔徑為0.03μm~10μm）微孔膜的研發(fā)及生產(chǎn)，具有二十多年服務(wù)與醫(yī)藥客戶經(jīng)驗(yàn)，并為全球生物制藥、醫(yī)療器械、食品飲料、實(shí)驗(yàn)室分析、微電子及工業(yè)等領(lǐng)域的客戶提供過(guò)濾、分離和凈化解決方案。

2022-12-26 12:55:446種脂溶性維生素的快速檢測(cè)方案: 維生素是維持人體生命活動(dòng)所必需的一類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，大多數(shù)由食物供給，屬于人體內(nèi)的一類調(diào)節(jié)物質(zhì)。維生素分為水溶維生素和脂溶維生素，脂溶性維生素是不溶于水而溶于脂類的一類維生素，在人體生長(zhǎng)、代謝、發(fā)育過(guò)程中發(fā)揮著重要作用，包含維生素A、維生素D、維生素E和維生素K。VD在肝臟可轉(zhuǎn)化為25羥基維生素D(25OH-VD)，其濃度水平與體內(nèi)的VD直接相關(guān)，因此體內(nèi)25OH-VD2、25OH-VD3可作為檢測(cè)VD水平的生物標(biāo)志物。VK是激活凝血因子以及蛋白質(zhì)C和S的必須輔助因子，目前已知主要有K1、K2、K3、K4幾種形式，四烯甲萘醌VK2(MK4)既是VK2的家族成員，也是肝外組織中K1的代謝物。當(dāng)這些脂溶性維生素缺乏或過(guò)量時(shí)均會(huì)對(duì)人體造成傷害。具體見下表：一次性評(píng)估體內(nèi)多種維生素水平，才能全面“查漏補(bǔ)缺”。準(zhǔn)確測(cè)定人體中性維生素的含量，可以幫助臨床醫(yī)生準(zhǔn)確評(píng)估人體維生素營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)、吸收障礙或毒性水平。解決方案沃特世團(tuán)隊(duì)依托質(zhì)譜平臺(tái)ACQUITY UPLC I-Class Xevo TQ-S IVD和 TQ-XS IVD開發(fā)了超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-MS/MS)技術(shù)在維生素檢測(cè)中的應(yīng)用，在5 min內(nèi)即可完成6種脂溶性維生素的同時(shí)分析。前處理采用Andrew Alliance機(jī)器人搭配Oasis μElution PRiME HLB的固相萃取板，實(shí)現(xiàn)樣本前處理自動(dòng)化，并解決LC-MS/MS檢測(cè)維生素的各種挑戰(zhàn)和難點(diǎn)。該方法檢出限低、分離效果好、穩(wěn)定性佳，可滿足臨床高通量自動(dòng)化檢測(cè)需求。圖1. Andrew+移液機(jī)器人用于6種脂溶性維生素前處理操作時(shí)的工作臺(tái)布局，以及ACQUITY UPLC I-Class Xevo TQ-XS IVD檢測(cè)平臺(tái)。實(shí)驗(yàn)部分前處理樣本預(yù)處理：取100 μL 血清或者BSA稀釋標(biāo)準(zhǔn)品，加入內(nèi)標(biāo)工作液，渦旋混勻，隨后加入乙腈沉淀蛋白，離心取上清液，做SPE凈化。液相色譜條件液相色譜系統(tǒng)：ACQUITY UPLC I-Class系統(tǒng)色譜柱：ACQUITY UPLC BEH C18色譜柱, 1.7 μm，2.1 mm x 50 mm進(jìn)樣體積：5 μL結(jié)果與討論高通量，一針進(jìn)樣，同時(shí)檢測(cè)該方案5 min內(nèi)即可完成6種脂溶性維生素的同時(shí)測(cè)定，可同時(shí)檢測(cè)血清中維生素A(VA)、25-羥基維生素D2(25OHVD2)、25-羥基維生素D3(25OHVD3)、維生素E(VE)、維生素K1(VK1)、四烯甲萘醌K2(VK2-MK-4)，真正實(shí)現(xiàn)“一針進(jìn)樣，同時(shí)檢測(cè)”。圖2. 6種脂溶性維生素的標(biāo)準(zhǔn)品和血清色譜圖。靈敏度高，線性范圍寬，滿足臨床檢測(cè)需求正常人體血清中維生素A含量113 - 977 ng/mL；維生素E含量3.8 - 17 μg/mL；維生素D含量20 - 50 ng/mL；維生素K1含量為0.10 - 2.20 ng/mL。由于6種脂溶性維生素在血清中含量差異較大，VK1、MK4和25OH-VD2含量低，同時(shí)測(cè)定高低濃度物質(zhì)是串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定的難點(diǎn)，常存在低濃度、靈敏度差及高濃度過(guò)飽和現(xiàn)象。而Xevo TQ-S IVD和TQ-XS IVD優(yōu)異的靈敏度及超寬線性范圍，可實(shí)現(xiàn)同時(shí)準(zhǔn)確定量這幾種維生素。自動(dòng)化前處理，滿足高通量檢測(cè)需求Andrew+機(jī)器人可在無(wú)人值守狀態(tài)下自動(dòng)完成移液、震蕩、混勻和96孔板SPE前處理過(guò)程。不僅大幅節(jié)省了樣品處理的時(shí)間，提高了通量，還可以簡(jiǎn)化樣品制備過(guò)程、減少實(shí)驗(yàn)失誤，從而確保分析結(jié)果的穩(wěn)定重現(xiàn)。手動(dòng)前處理96個(gè)樣本的時(shí)間大概是2 - 3 h。如果用Andrew+做自動(dòng)化前處理，只需要提前把溶劑和樣本放到設(shè)置好的Domino blocks里中就可以完成自動(dòng)化前處理和SPE流程。過(guò)程僅需不到1 h就可以完成。結(jié)論本方案使用Waters UPLC I-Class超高效液相色譜系統(tǒng)搭載UPLC色譜柱進(jìn)行分離，再用Xevo TQ-S IVD和TQ-XS IVD串聯(lián)四極桿質(zhì)譜儀對(duì)血清樣品中6種脂溶性維生素定量檢測(cè)。96個(gè)樣本的前處理不到1 h，每個(gè)樣本的液相分析時(shí)間僅5 min，每天可以檢測(cè)至少200例樣本。6個(gè)脂溶性維生素的加標(biāo)回收率85% - 115%之間，精密度RSD

2023-02-17 13:16:01核酸脂質(zhì)納米?？破铡猂NA-LNP包封率測(cè)定: 自新冠mRNA疫苗成功上市以來(lái)，脂質(zhì)納米粒（Lipid nanoparticle，LNP）已成為mRNA、siRNA、pDNA等核酸的優(yōu)先遞送載體，廣泛用于mRNA疫苗及治愈。微流控技術(shù)是目前制備核酸脂質(zhì)納米粒常用的技術(shù)，包封率則是評(píng)價(jià)其制備效果的重要指標(biāo)之一，下面就為大家介紹使用RiboGreen測(cè)定RNA-LNP包封率的方法。1 RiboGreen檢測(cè)RNA-LNP包封率的原理1.1RNA-LNP包封率（Encapsulationefficiency，EE）：包裹在脂質(zhì)納米粒內(nèi)部的RNA占RNA-LNP溶液中全部RNA的比例。1.2 RiboGreen檢測(cè)RNA原理：RiboGreen是一種用于定量檢測(cè)溶液中RNA含量的超敏感熒光核酸染料，當(dāng)RiboGreen熒光染料處于溶液狀態(tài)時(shí)，幾乎沒有熒光活性，與RNA結(jié)合時(shí)，其熒光活性將增加1000倍。RiboGreen-RNA復(fù)合物的熒光激發(fā)波長(zhǎng)約500nm，發(fā)射波長(zhǎng)約525nm，通過(guò)酶標(biāo)儀，建立已知濃度RNA的標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可得到樣品RNA濃度。1.3 RiboGreen檢測(cè)包封率原理：分別測(cè)定LNP-RNA溶液中游離RNA濃度，以及用Triton-100破壞LNP結(jié)構(gòu)后，溶液中全部的RNA濃度，兩者的差值就是包封在LNP內(nèi)部的RNA濃度。通過(guò)以下公式即可計(jì)算得到包封率結(jié)果。圖1核酸脂質(zhì)納米顆粒的示意圖2操作要點(diǎn)2.1制備Buffer1X TE Buffer：使用試劑盒中20X TE Buffer稀釋。2% Triton-TE buffer：使用Triton-100與1X TE buffer以體積比1：50配制。2.2添加RNA-LNP樣品至全黑96孔板根據(jù)制備時(shí)RNA的量，可以大致計(jì)算需要稀釋的倍數(shù)。例如，已知 mRNA的原始質(zhì)量或濃度，使用銘汰MicroFlow S進(jìn)行RNA-LNP合成，根據(jù)稀釋、超濾等處理后的最終體積，即可估算大致總RNA濃度。同時(shí)，假設(shè)90%的包封率，即可估算游離RNA濃度。然后根據(jù)標(biāo)曲的濃度計(jì)算需要稀釋的大致倍數(shù)。這樣我們就可以使用1X TE buffer將RNA-LNP稀釋適合倍數(shù)以檢測(cè)LNP外游離RNA濃度，使用2% Triton-TE buffer將RNA-LNP稀釋適合倍數(shù)以檢測(cè)總RNA濃度，建議每項(xiàng)檢測(cè)至少兩個(gè)不同稀釋倍數(shù)。然后，分別移取100 μL稀釋后的樣本，添加到全黑96孔板。2.3標(biāo)樣添加一般直接使用試劑盒中100 μg/mL的RNA標(biāo)樣，也可以使用與待測(cè)樣本類似的RNA標(biāo)樣來(lái)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。可以先用1X TE buffer將原始標(biāo)樣稀釋到工作濃度4 μg/mL，然后參考表1的體積比，配制為一定濃度梯度的標(biāo)樣。分別移取各濃度的標(biāo)樣100 μL，添加到全黑96孔板中。注：*最終RNA濃度考慮了步驟2.4添加RiboGreen染料后的濃度當(dāng)RNA-LNP樣品及特定濃度的標(biāo)樣添加到96孔板后，需要在37℃下避光孵育10 min，以使RNA-LNP在Triton buffer中充分裂解。2.4 RiboGreen染料添加把試劑盒中RiboGreen試劑，使用1X TE Buffer按照1：100的比例稀釋，例如需要2000 μL RiboGreen染料，可將20 μL的RiboGreen試劑添加到1980 μL的1X TE Buffer中。然后各取100 μL加入到已經(jīng)加有樣品的96孔板中，37℃下避光孵育5min。圖2 樣品添加2.5酶標(biāo)儀檢測(cè)打開酶標(biāo)儀，選擇熒光模式，激發(fā)光485nm，發(fā)射光528nm，讀數(shù)，記錄數(shù)據(jù)。 2.6數(shù)據(jù)處理及分析將每個(gè)樣本測(cè)得的熒光值減去空白熒光值，即可得到實(shí)際熒光值。根據(jù)標(biāo)樣的熒光值和濃度梯度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程。把樣品熒光值代入回歸方程，乘以稀釋倍數(shù)，即可得到樣本的RNA濃度。根據(jù)1.3中包封率公式計(jì)算得到包封率結(jié)果。圖3 標(biāo)準(zhǔn)曲線3 小結(jié)準(zhǔn)確的包封率測(cè)定對(duì)于評(píng)價(jià)RNA-LNP的包封效果至關(guān)重要，影響著后續(xù)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的開展。RNA-LNP包封率測(cè)定一般使用商業(yè)化的試劑盒，雖然操作環(huán)節(jié)較多，但只要細(xì)心規(guī)范，操作起來(lái)也并不難，相信大家可以得到準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。納米藥物制備系統(tǒng)應(yīng)用范圍：

2021-12-30 13:28:29豚鼠過(guò)氧化脂質(zhì)/乳過(guò)氧化物酶ELISAkit: 本生（天津）健康科技有限公供應(yīng)：豚鼠過(guò)氧化脂質(zhì)/乳過(guò)氧化物酶ELISAkit,LPOELISA檢測(cè)試劑盒【貨號(hào)】BS-A3724【規(guī)格】96T/48T【產(chǎn)品名稱】豚鼠過(guò)氧化脂質(zhì)/乳過(guò)氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)【保存條件】2-8℃。【有效期】6個(gè)月本生生物公司供應(yīng)：ELISA試劑盒,動(dòng)物血清,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細(xì)胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,進(jìn)口吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過(guò)濾器,分光光度計(jì)。豚鼠過(guò)氧化脂質(zhì)/乳過(guò)氧化物酶ELISAkit,LPOELISA檢測(cè)試劑盒注：產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)！兔6酮前列腺素F1aELISAkit,6-keto-PGF1aELISA檢測(cè)試劑盒兔血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1ELISAkit,VCAM-1/CD106ELISA檢測(cè)試劑盒兔血纖蛋白原ELISAkit,FbgELISA檢測(cè)試劑盒兔可溶性凋亡相關(guān)因子ELISAkit,sFAS/Apo-1ELISA檢測(cè)試劑盒兔抑瘤素MELISAkit,OSMELISA檢測(cè)試劑盒兔血管生成素2ELISAkit,ANG-2ELISA檢測(cè)試劑盒兔血管緊張素ⅡELISAkit,ANG-ⅡELISA檢測(cè)試劑盒兔子促黃體激素ELISAkit,LHELISA檢測(cè)試劑盒兔p53ELISAkit,p53ELISA檢測(cè)試劑盒牛傳染性胸膜肺炎抗體ELISAkit,IFP-AbELISA檢測(cè)試劑盒牛結(jié)核抗體ELISAkit,TB-AbELISA檢測(cè)試劑盒牛輪狀病毒ELISAkit,RVELISA檢測(cè)試劑盒牛載脂蛋白A1ELISAkit,apo-A1ELISA檢測(cè)試劑盒牛副結(jié)核抗體ELISAkit,PBS-abELISA檢測(cè)試劑盒牛晚期糖基化終末產(chǎn)物ELISAkit,AGEsELISA檢測(cè)試劑盒

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