
- 2025-01-10 17:03:03光散射分析多聚體
- 光散射分析多聚體是一種利用光散射原理研究多聚體(高分子化合物)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)的分析技術(shù)。該技術(shù)通過測量散射光的強(qiáng)度、角度分布等參數(shù),可獲取多聚體的分子量分布、分子形態(tài)、鏈段運(yùn)動等信息。光散射分析具有非破壞性、高靈敏度等優(yōu)點(diǎn),在材料科學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、化學(xué)工程等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用,是研究多聚體材料結(jié)構(gòu)與性能關(guān)系的重要手段之一。
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光散射分析多聚體資訊
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- 根據(jù)使用TSKgel UP-SW3000-LS時的蛋白質(zhì)非特異性吸附率進(jìn)行反向推算,使用該色譜柱只需2次進(jìn)樣(老化處理)即可準(zhǔn)確分離微量蛋白樣品并可獲得良好的重現(xiàn)性。
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光散射分析多聚體問答
- 2022-01-26 16:13:03【知識庫】為什么GPC需要光散射?
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- 2023-01-04 16:50:04【AM-AN-22025A】標(biāo)準(zhǔn)粒子在光散射研究中的應(yīng)用
- 全文共1834字,閱讀大約需要6分鐘關(guān)鍵詞:標(biāo)準(zhǔn)粒子;米氏散射光的散射(scattering of light)是指光通過不均勻介質(zhì)時一部分光偏離原方向傳播的現(xiàn)象。偏離原方向的光稱為散射光。散射光頻率不發(fā)生改變的有瑞利散射、米氏散射和大粒子散射;頻率發(fā)生改變的有拉曼散射、布里淵散射和康普頓散射等。而標(biāo)準(zhǔn)粒子在光散射研究領(lǐng)域一般研究的是粒子的瑞利散射、米氏散射和大粒子散射,這三種散射劃分是根據(jù)入射光λ與散射粒子的直徑d之間的比例大小來確定的:①當(dāng)散射粒子的直徑d與入射光波長λ之比(d/λ)很小,即數(shù)量級顯著小于0.1 時,則屬于瑞利散射,散射光強(qiáng)與波長的關(guān)系符合瑞利散射定律,即散射光強(qiáng)與入射光的波長四次方成反比,與粒徑的六次方成正比。②當(dāng)散射粒子粒徑與光波長可以比擬(d/λ的數(shù)量級為0.1~10)時,隨著粒子直徑的增大,散射光強(qiáng)與波長的依賴關(guān)系逐漸減弱,而且散射光強(qiáng)隨波長的變化出現(xiàn)起伏,這種起伏的幅度也隨著比值d/λ的增大而逐漸減少,這種散射稱為米氏散射。③當(dāng)粒子足夠大時(d/λ>10),散射光強(qiáng)基本上與波長沒有關(guān)系,這種粒子的散射稱為大粒子散射,也可稱之為衍射散射(菲涅爾衍射與夫瑯禾費(fèi)衍射)。瑞利散射可以說是米氏散射理論模型在小粒子端的近似形式,而衍射散射也可以說是米氏散射理論模型在大粒子端的近似形式,接下來我們將詳細(xì)了解標(biāo)準(zhǔn)粒子應(yīng)用于米氏散射理論對其光散射特性研究中,入射光波長、標(biāo)粒直徑以及入射光偏振角對散射光強(qiáng)的影響。1入射光波長對散射光強(qiáng)分布的影響圖1.1 是相對折射率m=1.589/1.333,標(biāo)準(zhǔn)粒子直徑d=2μm,入射光偏振角φ=45°時,由Mie散射理論及其他相關(guān)公式編程計算得到的散射光強(qiáng)與散射角之間的變化關(guān)系曲線。對于直徑為2μm的聚苯乙烯微球在水中的散射情況,入射光偏振角為45°時,隨著入射波長λ的增大,散射光強(qiáng)由主要集中在前向小角度內(nèi)(波長λ為0.2um時散射光強(qiáng)主要集中在10°散射角內(nèi))逐漸變?yōu)榧性谇跋蛏源蠼嵌葍?nèi)(波長λ為0.8um時散射光強(qiáng)主要集中在30°散射角內(nèi)),若繼續(xù)增大波長,散射光強(qiáng)集中的角度也將繼續(xù)增大。從圖1.1可以看出,波長較短時散射光強(qiáng)主要集中在前向小角度內(nèi),并且波長越短散射光強(qiáng)集中的角度越小。圖1.1:當(dāng)m=1.589/1.333,d=2μm,φ=45°時,對應(yīng)于不同的波長,散射光強(qiáng)與散射角間的關(guān)系曲線。聚苯乙烯微球直徑對散射光強(qiáng)分布的影響圖2.1是用可見波段中的0.65μm波長的入射光,在偏振角為45°時,聚苯乙烯微球在水中的散射光強(qiáng)與散射角的變化關(guān)系曲線。由圖可以看出,微粒直徑越大散射光強(qiáng)越集中分布在前向小角度內(nèi),粒徑大于2μm的粒子的散射光強(qiáng)主要集中在前向散射角約20°內(nèi),因此在此種條件下收集前向小角度的散射光強(qiáng)即可獲得粒子的較好信息。圖2.2是入射光波長為6μm,偏振角45°時,聚苯乙烯微球在空氣中的散射光強(qiáng)與散射角的變化關(guān)系曲線。由圖可知,所用波長較大時,較大粒子的散射光強(qiáng)不再集中在前向小角度內(nèi)而是集中的角度逐漸變大,例如粒徑大于8μm的粒子的散射光強(qiáng)主要集中在前向散射角約40°內(nèi)。圖2.1:當(dāng)m=1.589/1.333, λ=0.65μm, φ=45°時,對應(yīng)于不同的微粒直徑,散射光強(qiáng)與散射角間的關(guān)系曲線。 圖2.2:當(dāng)m=1.589, λ=6μm, φ=45°時,對應(yīng)于不同的粒徑,散射光強(qiáng)與散射角間的變化曲線入射光偏振角對散射光強(qiáng)分布的影響圖3.1是入射光波長為0.65μm,直徑為0.2μm的聚苯乙烯微球在空氣中的散射光強(qiáng)與散射角的變化關(guān)系曲線。由圖可以看出,此種情況下入射光的偏振角不同散射光強(qiáng)與散射角間的關(guān)系曲線有很大變化,散射光強(qiáng)分布比較分散,說明此時散射光強(qiáng)的角分布與偏振光的偏振角有關(guān)。圖3.1 當(dāng)m=1.589, λ=0.65μm, φ=0.2μm時,對應(yīng)于不同的偏振角,散射光強(qiáng)與散射角間的變化曲線。結(jié)論以上為應(yīng)用米氏散射理論針對聚苯乙烯微球標(biāo)準(zhǔn)粒子的光散射性質(zhì)進(jìn)行的分析,得出以下結(jié)論:(1)波長較短時散射光強(qiáng)主要集中分布在前向小角度內(nèi),并且波長越短散射光強(qiáng)集中分布的角度越小。收集前向小角度的散射光可大致反映粒子散射信息。(2)進(jìn)行聚苯乙烯微球標(biāo)粒散射方面的研究時,應(yīng)該選擇可見光波段中波長較短的作為光源,這樣既可以得到較好的粒子散射信息,又可以避免光源對人體造成傷害。(3)粒子直徑較大時散射光強(qiáng)主要集中分布在前向小角度內(nèi),并且粒子直徑越大散射光強(qiáng)越集中分布在小角度內(nèi);若所用波長較大時,較大粒子的散射光強(qiáng)不再集中分布在前向小角度內(nèi)而是集中分布的角度逐漸變大。參考資料1.李建立.基于光散射的微粒檢測.煙臺大學(xué)理學(xué)院碩士論文,2009:22-25.
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- 2022-09-10 14:33:21光散射技術(shù)在疫苗和基因載體中的應(yīng)用
- 光散射技術(shù)解決方案:疫苗和基因載體的關(guān)鍵質(zhì)量屬性表征和質(zhì)量控制01會議詳情主題:光散射技術(shù)在疫苗和基因載體中的應(yīng)用時間:2022年9月15日 19:00內(nèi)容:SEC-MALS、DLS原理講解DLS、HT-DLS實例應(yīng)用:AAV/LVSEC-MALS的AAV分析(Vg/Cp)方法FFF-MLAS與SEC-MALS的對比:LNP分析02參加會議會議鏈接:https://paj.h5.xeknow.com/sl/2gT5z2或掃碼加入會議
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- 2024-01-15 17:30:19包涵體蛋白復(fù)體常見十大問題解析
- 在生命科學(xué)領(lǐng)域中,包涵體復(fù)體的研究占據(jù)了重要的地位。但隨著研究的深入,一些問題逐漸浮現(xiàn)。本文將對包涵體復(fù)體研究中常見的挑戰(zhàn)進(jìn)行解析,以及為研究者提供一些解決思路。 ①包涵體復(fù)性原則:低濃度,平緩梯度,低溫。 ②怎樣洗滌包涵體?通常的洗滌方法一般是洗不干凈的,可以先把包涵體用6M鹽酸胍溶解充分,過濾除去未溶解的物質(zhì),注意留樣跑電泳,然后用水稀釋到4M,離心把沉淀和上清分別跑電泳,如此類推可以一直稀釋到合適的濃度,可以找到一個合適去除雜質(zhì)的辦法,其實這就是梯度沉淀的方法,比通常的直接洗脫效果好。 ③對于尿素和鹽酸胍該怎么選擇尿素和鹽酸胍屬中強(qiáng)度變性劑,易經(jīng)透析和超濾除去。它們對包涵體氫鍵有較強(qiáng)的可逆性變性作用,所需濃度尿素8-10M,鹽酸胍6-8M。尿素溶解包涵體較鹽酸胍慢而弱,溶解度為70-90%,尿素在作用時間較長或溫度較高時會裂解形成氰酸鹽,對重組蛋白質(zhì)的氨基進(jìn)行共價修飾,但用尿素溶解具有不電離,呈中性,成本低,蛋白質(zhì)復(fù)性后除去不會造成大量蛋白質(zhì)沉淀以及溶解的包涵體可選用多種色譜法純化等優(yōu)點(diǎn),故目前已被廣泛采用。 鹽酸胍溶解能力達(dá)95%以上,且溶解作用快而不造成重組蛋白質(zhì)的共價修飾。但它也有成本高、在酸性條件下易產(chǎn)生沉淀、復(fù)性后除去可能造成大量蛋白質(zhì)沉淀和對蛋白質(zhì)離子交換色譜有干擾等缺點(diǎn)。 ④8M尿素溶解的包涵體溶液應(yīng)如何保存?在4度放置半個月,都沒什么問題 。在室溫放置超過48小時,可能會對目的蛋白有影響,因為尿素在堿性條件下可使一些氨基酸?;栽缧┨幚鞡I溶液比較好。 ⑤復(fù)性時的蛋白濃度一般使用濃度為0.1-1.0mg/ml,太高的濃度容易形成聚體沉淀,太低的濃度不經(jīng)濟(jì),而且很多蛋白在低濃度時不穩(wěn)定,很容易變性。 ⑥蛋白復(fù)性后濃度低蛋白可能是在復(fù)性的過程中發(fā)生降解了。 可以將復(fù)性好的蛋白濃縮一下泡膠看看。復(fù)性過程一般都是低濃度蛋白,需要保證分子間有足夠的折疊空間。一些未正確折疊的蛋白就存在于沉淀中,可能沉淀看不出來,復(fù)性后的蛋白高速離心看看。 ⑦復(fù)性中蛋白析出是怎么回事?該怎么處理?出現(xiàn)蛋白析出,肯定是條件變化太劇烈了。 復(fù)性應(yīng)該采取復(fù)性液濃度和PH值逐漸變化的方法,例如根據(jù)包涵體的溶液成分,每隔1個PH或濃度值配置一種溶液,逐步透析到正常。此外透析時必須濃度極低,條件溫和,使蛋白質(zhì)能夠正確折疊。但是復(fù)性的比率應(yīng)該很低。 若加變性劑尿素可加到2M,鹽酸胍可加到1-1.5M; 另外可將甘油濃度增加,范圍可在≤30%,且在復(fù)性樣品中也可加適量甘油。 ⑧復(fù)性效果的檢測根據(jù)具體的蛋白性質(zhì)和需要,可以從生化、免疫、物理性質(zhì)等方面對蛋白質(zhì)的復(fù)性效率進(jìn)行檢測。 凝膠電泳:一般可以用非變性的聚丙烯酰胺凝膠電泳可以檢測變性和天然狀態(tài)的蛋白質(zhì),或用非還原的聚丙烯酰胺電泳檢測有二硫鍵的蛋白復(fù)性后二硫鍵的配對情況。光譜學(xué)方法:可以用紫外差光譜、熒光光譜、圓二色性光譜(CD)等,利用兩種狀態(tài)下的光譜學(xué)特征進(jìn)行復(fù)性情況的檢測,但一般只用于復(fù)性研究中的過程檢測。色譜方法:如IEX、RP-HPLC、CE等,由于兩種狀態(tài)的蛋白色譜行為不同。生物學(xué)活性及比活測定:一般用細(xì)胞方法或生化方法進(jìn)行測定,較好的反映了復(fù)性蛋白的活性,值得注意的是,不同的測活方法測得的結(jié)果不同,而且常常不能完全反映體內(nèi)活性。黏度和濁度測定:復(fù)性后的蛋白溶解度增加,變性狀態(tài)時由于疏水殘基暴露,一般水溶性很差,大多形成可見的沉淀析出。免疫學(xué)方法:如ELISA、WESTERN等,特別是對結(jié)構(gòu)決定簇的抗體檢驗,比較真實的反映了蛋白質(zhì)的折疊狀態(tài)。 ⑨變性的融合蛋白可以制備多抗或者單抗嗎?變性蛋白只是天然蛋白伸直的產(chǎn)物,用來免疫動物具有更強(qiáng)的抗原性。只是天然蛋白中被包在內(nèi)部的抗原決定簇也會暴露出來,如果用該變性抗原制備的抗體來檢測變性抗原是可以的,如果用來檢測天然蛋白,可能會有假陽性。做單抗也可以,同樣道理,篩選出的單抗可能對抗的抗原決定簇處于天然抗原的內(nèi)部,是否能用還要看將來該單抗用來干什么。 ⑩純化后的可溶性融合蛋白可以直接用于制備多抗嗎?免疫動物要求抗原體種盡量小。在這種小體積的情況下,緩沖液里的小分子成分只要沒毒影響就不大,可以不用考慮。 更多蛋白復(fù)體詳情可以上義翹神州網(wǎng)咨詢!
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- 2025-01-07 19:45:16背向散射x射線檢測儀有什么具體作用?
- 背向散射X射線檢測儀:提升工業(yè)檢測精度與效率的關(guān)鍵工具 在現(xiàn)代工業(yè)領(lǐng)域中,檢測與質(zhì)量控制技術(shù)的精確性和效率至關(guān)重要。背向散射X射線檢測儀作為一種高效的無損檢測工具,廣泛應(yīng)用于金屬、塑料、電子元器件等材料的檢測與分析。其獨(dú)特的工作原理使得它能夠在不破壞樣品的情況下,對物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和成分進(jìn)行詳細(xì)檢查,從而幫助工程師和技術(shù)人員提高生產(chǎn)質(zhì)量和降低故障率。本文將深入探討背向散射X射線檢測儀的工作原理、應(yīng)用場景及其在工業(yè)領(lǐng)域中的重要作用。 背向散射X射線檢測儀的工作原理 背向散射X射線檢測儀(Backscattering X-ray Inspection System, BXIS)利用X射線照射物體表面時,X射線與物體內(nèi)的原子發(fā)生散射的原理來獲取樣品的內(nèi)部信息。當(dāng)X射線通過樣品時,一部分射線被樣品表面的元素散射并反射回檢測器。通過分析這些反向散射的X射線信號,儀器可以推測出物質(zhì)的密度、厚度和組成成分等信息。這種無損檢測方式不僅能高效快速地獲取樣品數(shù)據(jù),而且具有較高的分辨率和準(zhǔn)確度。 背向散射X射線檢測儀的應(yīng)用領(lǐng)域 背向散射X射線檢測儀被廣泛應(yīng)用于多個行業(yè),尤其是在那些要求高精度、高效率的領(lǐng)域。以下是其典型應(yīng)用場景: 金屬行業(yè) 在金屬加工與制造中,背向散射X射線檢測儀能夠快速識別金屬材料的內(nèi)部缺陷,例如裂紋、氣孔、夾雜物等。這種檢測方式不僅能夠提高檢測效率,還能避免因傳統(tǒng)的破壞性檢測方法造成材料浪費(fèi)。 電子制造行業(yè) 隨著電子產(chǎn)品的日益小型化,傳統(tǒng)的檢測方法面臨著諸多挑戰(zhàn)。背向散射X射線檢測儀可以在不破壞電子元器件的情況下,檢測電路板的內(nèi)部結(jié)構(gòu),發(fā)現(xiàn)潛在的焊接問題、短路或其他缺陷,確保電子產(chǎn)品的高質(zhì)量生產(chǎn)。 材料科學(xué)與研究 在材料科學(xué)研究中,背向散射X射線檢測儀用于分析不同材料的微觀結(jié)構(gòu)、元素成分及其分布情況。這為新材料的開發(fā)與優(yōu)化提供了強(qiáng)有力的工具支持。 汽車制造業(yè) 在汽車制造過程中,背向散射X射線檢測儀可以用來檢查汽車零部件的內(nèi)部質(zhì)量,特別是在發(fā)動機(jī)和車體的關(guān)鍵部位。通過這種檢測,制造商能夠確保產(chǎn)品的安全性和耐用性。 背向散射X射線檢測儀的優(yōu)勢與挑戰(zhàn) 背向散射X射線檢測儀相較于傳統(tǒng)的檢測方法,具有許多顯著優(yōu)勢。它是一種無損檢測技術(shù),能夠在不對樣品造成任何損害的情況下獲取數(shù)據(jù),確保生產(chǎn)線上的物料得以大化利用。背向散射X射線檢測儀能夠在極短的時間內(nèi)完成檢測,大大提高了生產(chǎn)效率,尤其適用于大規(guī)模生產(chǎn)的場合。其高分辨率和高精度的特點(diǎn)使得它能夠精確檢測微小缺陷,為品質(zhì)控制提供強(qiáng)有力的保障。 盡管背向散射X射線檢測儀具有多項優(yōu)勢,仍然存在一些挑戰(zhàn)。由于X射線輻射對人體有一定的危險性,因此在操作過程中必須嚴(yán)格遵守安全規(guī)范,確保操作人員的安全。背向散射X射線檢測儀的購買和維護(hù)成本較高,這對一些中小型企業(yè)來說可能是一個負(fù)擔(dān)。因此,在實際應(yīng)用中需要平衡成本與效益。 結(jié)論 背向散射X射線檢測儀憑借其無損、高效、高精度的特點(diǎn),已經(jīng)成為現(xiàn)代工業(yè)領(lǐng)域中不可或缺的重要工具。無論是在金屬加工、電子制造、材料科學(xué)研究,還是汽車生產(chǎn)中,它都展現(xiàn)出強(qiáng)大的檢測能力和巨大的應(yīng)用潛力。盡管在操作安全和成本控制上仍面臨挑戰(zhàn),但隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步和行業(yè)需求的不斷提升,背向散射X射線檢測儀無疑將在更多領(lǐng)域發(fā)揮其重要作用。
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