
- 2025-01-10 10:49:44多維度生物活性因子
- 多維度生物活性因子是指在生物學領(lǐng)域內(nèi),具有多種生物活性的物質(zhì)或分子。這些因子能夠影響細胞增殖、分化、凋亡等生命過程,從而在多個維度上調(diào)節(jié)生物體的生理和病理狀態(tài)。它們廣泛存在于生物體內(nèi),包括蛋白質(zhì)、多肽、小分子化合物等,對于維持生物體穩(wěn)態(tài)、促進組織修復(fù)、調(diào)節(jié)免疫功能等方面具有重要作用。
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多維度生物活性因子相關(guān)內(nèi)容
多維度生物活性因子資訊
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- 手把手教你進行多維度生物活性因子評價
- 我們已知 TNFα(腫瘤壞死因子 α)是一種涉及到系統(tǒng)性炎癥的細胞因子,同時也是屬于引起急相反應(yīng)的眾多細胞因子中的一員。
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多維度生物活性因子問答
- 2023-06-28 09:33:13小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒操作概要
- 小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒操作概要 僅供體外研究使用,不用于臨床診斷! 本試劑盒運用雙抗體夾心ELISA法定量測定小鼠血清、血漿、組織勻漿、細胞裂解液、細胞培養(yǎng)上清液和其他生物液體中小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)含量?! z測范圍 0.781-50ng/mL 檢測限 0.35ng/mL 實驗原理 將小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)與連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入生物素化的小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)抗體,將未結(jié)合的生物素化抗體洗凈后,加入HRP標記的親和素,再次洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。 試劑盒內(nèi)容 試劑名稱數(shù)量試劑名稱數(shù)量 96孔板(預(yù)包被)196孔板覆膜2 標準品0.5ml×1標準品稀釋液1.5ml×1瓶 顯色劑A液6ml×1瓶樣品稀釋液6ml×1瓶 顯色劑B液6ml×1瓶終止液6ml×1瓶 酶標試劑6ml×1瓶密封袋1 濃洗滌液(30×)1×20mL使用說明書1 小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒需自備的設(shè)備及試劑 1. 450±10nm濾光片的酶標儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱) 2. 單道或多道微量加液器及吸頭 3. 稀釋樣品的EP管 4. 蒸餾水或去離子水 5. 吸水紙 6. 盛放洗液的容器 試劑盒的儲存及有效期 1. 未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液,終止液保存于4℃,其他試劑保存于-20℃?! ?. 使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕?! ∽⒁猓骸 ≡噭┖袃?nèi)酶標條可拆卸,按實驗需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在實驗后 1個月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期時間以盒子上的標簽為準,保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的?! ⌒∈笊厣掀ぱ苌蜃?PEDF)ELISA試劑盒標本的采集與保存 1. 血清: 將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置 2 小時或 4oC 過夜,然后 1000×g 離心 20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融?! ?. 血漿: 用 EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的 30 分鐘內(nèi)于 2-8oC 1000×g 離心 15 分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20oC或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 3. 組織勻漿: 1) 取適量組織塊,于預(yù)冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液,稱重后備用(組織塊較大需先剪碎后再勻漿); 2) 可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果:首先將組織塊移入玻璃勻漿器,加入5-10mL 預(yù)冷PBS 進行充分研磨,該過程需在冰上進行(有條件實驗室可選用機器勻漿);得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融 進一步處理(超聲破碎過程中注意冰浴降溫;反復(fù)凍融法可重復(fù)2次)?! ?) 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘,留取上清即可檢測?! ?. 細胞裂解液: 1)貼壁細胞需要先用胰酶消化,離心收集細胞(懸浮細胞可直接離心收集); 2)將收集到的細胞用冷PBS 洗3 次; 3)物理方法裂解細胞(可先超聲破碎細胞,再反復(fù)凍融): i 超聲破碎:取適量PBS 重懸細胞,用一定功率的超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震蕩破裂?! i 反復(fù)凍融:將待破碎的細胞在-20 oC 以下冰凍,室溫融解,反復(fù)3 次,使細胞溶脹破碎。 4)將標本于2-8 oC 1500×g 離心10 分鐘,收集上清備用。 5. 細胞培養(yǎng)上清或其它生物標本: 請 1000×g 離心 20 分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 注意: 1. 以上標本均需密封保存,4oC保存應(yīng)小于1周,-20oC不應(yīng)超過1個月,-80oC不應(yīng)超過2個月?! ?. 標本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫,不應(yīng)加熱使之融解?! ?. 實驗前紅細胞裂解液必須用標準品稀釋液稀釋?! ⌒∈笊厣掀ぱ苌蜃?PEDF)ELISA試劑盒試劑準備 1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解?! ?. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為50ng/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液?! ?. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。 標本處理 1. 本公司只對試劑盒本身負責,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本?! ?. 實驗前應(yīng)預(yù)測標本含量,如果標本濃度過高,應(yīng)對標本進行稀釋,使稀釋后的標本符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)?! ?. 若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中,建議進行預(yù)實驗驗證其有效性,并注意留存樣本?! ?. 使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質(zhì)的引入導(dǎo)致 ELISA實驗結(jié)果偏差?! ?. 若樣本為細胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素 較多,如:細胞狀態(tài)、細胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。 6. 某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出?! ?. 建議使用新鮮樣本,保存時間過長可能會存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實驗結(jié)果偏差?! ⌒∈笊厣掀ぱ苌蜃?PEDF)ELISA試劑盒操作步驟 1. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻?! ?. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘?! ?. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用 4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干?! ?. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外?! ?. 溫育:操作同3?! ?. 洗滌:操作同5?! ?. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 9. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)?! ?0. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行?! ∽⒁猓骸 ?. 試劑準備:準備一次實驗所需要的酶標條,其它的可從微孔板上拆下,密封,按照說明書要求保存,以備下次使用?! ?. 加樣:實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。加樣時注意不要有氣泡,將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。加樣或加試劑時,個孔與一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的“預(yù)溫育”時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復(fù)性。因此,一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi)。推薦設(shè)置復(fù)孔進行實驗?! ?. 溫育:為防止樣品蒸發(fā),實驗時請將加上蓋或覆膜的酶標板置于濕盒內(nèi),以避免液體蒸發(fā),洗板后應(yīng)盡快進行下步操作,任何時侯都應(yīng)避免酶標板處于干燥狀態(tài),同時應(yīng)嚴格遵守給定的溫育時間和溫度?! ?. 洗滌:充分的洗滌非常重要,在每次洗滌過程中,都要將洗滌液甩干。洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響的酶標儀讀數(shù)。如果有自動洗板機,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實 驗過程中?! ?. 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘觀察一次),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)?! ?. 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射?! ?. 如果實驗室內(nèi)濕度低于60%,推薦使用加濕器提高濕度水平。 實驗流程 1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備; 2. 加樣(標準品及樣本)50μL,37℃孵育30分鐘; 3. 洗板5次,加酶標試劑50ul,37℃孵育半小時; 4. 洗板5次;加入顯色液A,B各50ul,37℃孵育顯色15分鐘 5. 加終止液50μL,立即450nm讀數(shù)?! ?. 計算 小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒計算 各標準品及樣本O.D.值扣除空白孔O.D.值后作圖(七點圖),如設(shè)置復(fù)孔,則應(yīng)取其平均值計算。以標準品的濃度為縱坐標(或?qū)?shù)坐標),O.D.值為橫坐標(或?qū)?shù)坐標),繪出標準曲線(方程式應(yīng)依回歸方程計算的R2值來定,以R2值越趨近于1為好)。推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進行分析,如curve expert 1.30,根據(jù)樣品O.D.值,由標準曲線查出相應(yīng)的濃度,乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與O.D.值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的O.D.值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。 特異性 本試劑盒用于檢測小鼠色素上皮衍生因子(PEDF),經(jīng)檢測與其它相似物質(zhì)無明顯交叉反應(yīng)?! ∮捎谑艿郊夹g(shù)及樣本來源的限制,不可能完成對所有相關(guān)或相似物質(zhì)交叉反應(yīng)檢測,因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測的其它物質(zhì)有交叉反應(yīng)?! 【芏取 【芏扔脴悠窚y定值的變異系數(shù)CV表示。CV(%) = SD/mean×100 批內(nèi)差:取同批次試劑盒對低、中、高值定值樣本進行定量檢測,每份樣本連續(xù)測定20 次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值?! ∨g差:選取3個不同批次的試劑盒分別對低、中、高值定值樣本進行定量測定,每個樣本使用同一試劑盒重復(fù)測定8次,分別計算不同濃度樣本的平均值及SD值。 批內(nèi)差: CV
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- 2025-01-21 12:15:12霉菌培養(yǎng)箱用處多嗎?
- 霉菌培養(yǎng)箱用處 霉菌培養(yǎng)箱是一種用于控制濕度、溫度、光照等環(huán)境因素的專用設(shè)備,廣泛應(yīng)用于微生物學研究、藥物開發(fā)、環(huán)境監(jiān)測以及食品安全等多個領(lǐng)域。它的主要功能是為霉菌的生長提供理想的環(huán)境,以便進行精確的實驗觀察和數(shù)據(jù)分析。隨著科技進步,霉菌培養(yǎng)箱的使用范圍不斷擴展,不僅限于實驗室,還在生產(chǎn)過程中扮演著重要角色。本文將深入探討霉菌培養(yǎng)箱的多種用處,幫助讀者更好地了解其應(yīng)用價值。 1. 微生物學研究中的應(yīng)用 霉菌培養(yǎng)箱廣泛的應(yīng)用之一是在微生物學研究中。許多微生物的生長、繁殖與霉菌密切相關(guān),研究人員通常通過控制培養(yǎng)環(huán)境來分析霉菌的生長特性。例如,在藥物開發(fā)中,霉菌培養(yǎng)箱能夠模擬不同的溫濕度條件,研究人員利用這些條件觀察霉菌的反應(yīng),為新藥的研發(fā)提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。通過控制實驗環(huán)境,霉菌培養(yǎng)箱能夠幫助科研人員深入理解霉菌的代謝過程,從而為微生物學的進展作出貢獻。 2. 食品行業(yè)中的應(yīng)用 霉菌培養(yǎng)箱在食品行業(yè)的應(yīng)用也非常廣泛,尤其是在食品安全和質(zhì)量控制方面。在食品加工過程中,霉菌的存在可能導(dǎo)致食品變質(zhì),甚至對人類健康造成威脅。霉菌培養(yǎng)箱能夠提供模擬的環(huán)境,用于檢測和評估食品中可能存在的霉菌種類。通過定期對食品樣品進行培養(yǎng)分析,食品生產(chǎn)商可以在早期發(fā)現(xiàn)霉菌污染,并采取有效措施加以防范,確保食品的安全性與品質(zhì)。 3. 藥品開發(fā)與質(zhì)量控制 在制藥行業(yè),霉菌培養(yǎng)箱也發(fā)揮著重要作用。某些藥物的生產(chǎn)過程可能涉及霉菌的培養(yǎng)和篩選,以確保藥物的有效性和穩(wěn)定性。通過精確控制培養(yǎng)箱內(nèi)的環(huán)境參數(shù),藥品制造商可以對霉菌的生長過程進行有效監(jiān)控,并確保所培養(yǎng)的霉菌種類符合要求。霉菌培養(yǎng)箱還可用于藥品的穩(wěn)定性測試,模擬不同的環(huán)境變化對藥品質(zhì)量的影響,從而為藥品質(zhì)量控制提供數(shù)據(jù)支持。 4. 環(huán)境監(jiān)測與污染控制 隨著環(huán)境污染問題的加劇,霉菌培養(yǎng)箱在環(huán)境監(jiān)測中的作用日益重要。霉菌在自然環(huán)境中廣泛分布,對空氣、水源及土壤等環(huán)境質(zhì)量產(chǎn)生重要影響。利用霉菌培養(yǎng)箱,研究人員可以模擬污染環(huán)境,評估霉菌在不同污染物條件下的生長情況。例如,空氣中的霉菌濃度較高時,可能會導(dǎo)致健康問題,培養(yǎng)箱可以幫助研究人員深入分析污染源與霉菌生長之間的關(guān)系,從而為環(huán)境治理和公共健康管理提供科學依據(jù)。 5. 教育培訓(xùn)中的作用 霉菌培養(yǎng)箱在教育培訓(xùn)領(lǐng)域也有著重要的作用。在微生物學課程或?qū)嶒炚n上,學生通過霉菌培養(yǎng)箱進行實際操作,能夠掌握霉菌的生長原理及其培養(yǎng)方法。教師可以利用培養(yǎng)箱控制環(huán)境因素,讓學生通過觀察霉菌的生長情況,進一步理解微生物的基本知識。實驗教學不僅幫助學生加深對理論的理解,還為他們提供了實踐經(jīng)驗,促進了教學與科研的結(jié)合。 6. 工業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用 霉菌培養(yǎng)箱還廣泛應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)中,尤其是在發(fā)酵生產(chǎn)過程中。許多工業(yè)產(chǎn)品,如釀酒、醬油、醋等,都需要特定種類的霉菌進行發(fā)酵培養(yǎng)。在此過程中,霉菌培養(yǎng)箱提供了一個精確控制的環(huán)境,保證霉菌能夠在佳條件下生長繁殖,從而提高產(chǎn)品的質(zhì)量和產(chǎn)量。 結(jié)語 霉菌培養(yǎng)箱作為一種專業(yè)設(shè)備,在多個領(lǐng)域中具有不可替代的重要作用。通過精確控制環(huán)境因素,霉菌培養(yǎng)箱能夠為微生物學研究、食品安全、藥品開發(fā)、環(huán)境監(jiān)測等方面提供穩(wěn)定、可重復(fù)的實驗條件。隨著技術(shù)的不斷發(fā)展,霉菌培養(yǎng)箱的應(yīng)用前景也將更加廣闊,它將在更多領(lǐng)域發(fā)揮出重要作用,推動科學研究和產(chǎn)業(yè)發(fā)展邁向新的高度。
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- 2023-06-01 17:29:38DSC測試覆銅板PCB玻璃化轉(zhuǎn)變溫度Tg和固化因子ΔTg
- 本文介紹了用差示掃描量熱儀(DSC)測試覆銅板PCB玻璃化轉(zhuǎn)變溫度和固化因子ΔTg。印刷電路板(PCB, Printed Circuit Board)是重要的電子部件,是電子元器件的支撐體。PCB的樹脂成分發(fā)生玻璃化轉(zhuǎn)變時,PCB的整體力學性能和介電性能大幅減弱,故此PCB需要足夠高的Tg。DSC是測試Tg最為普遍的一種熱分析手段,在發(fā)生玻璃化轉(zhuǎn)變的過程中,樣品的比熱會出現(xiàn)特征性變化,即在DSC曲線上表現(xiàn)出臺階式的轉(zhuǎn)變。玻璃化轉(zhuǎn)變溫度Tg就是高分子聚合物最重要的特征性能之一,是FR-4基材等級最常見的劃分方式之一,也是IIPC-4101 《剛性及多層印制板基材規(guī)范》中最重要的性能指標之一。通常認為,玻璃化轉(zhuǎn)變溫度越高,層壓板的可靠性越高。PCB使用DSC玻璃化轉(zhuǎn)變溫度測試標準可參考IPC-TM-650 2.4.25。除了玻璃化轉(zhuǎn)變溫度以外,固化度也會影響材料的使用溫度、強度、膨脹系數(shù)、失效情況等性質(zhì)。由于增強材料和其他填料的存在,PCB無法像聚合物基體材料一樣通過測量殘余固化熱來判斷固化程度。大量的研究和實踐經(jīng)驗表明,Tg強烈依賴于固化程度。因此可以將材料再次經(jīng)歷固化條件,對比再次固化前后的Tg變化,得出固化程度的結(jié)論。IPC-TM-650 2.4.25,將再次固化前后的Tg分別定義為Tg1和Tg2,將兩次Tg之差(Tg2-Tg1)定義為固化因子ΔTg。為了便于比較,標準還規(guī)定,以玻璃化轉(zhuǎn)變臺階的中點或拐點溫度作為Tg。圖1為某覆銅板PCB的DSC玻璃化轉(zhuǎn)變溫度結(jié)果。第一次加熱的Tg1為133.3℃,第二次加熱的Tg2為136.2℃。由此可以獲得固化因子ΔTg為2.9℃。環(huán)氧體系的PCB,目前行業(yè)中標準認為ΔTg大于5℃時,材料的固化程度不完全,需要提高固化程度;當ΔTg小于5℃時,產(chǎn)品固化完全。但要注意,即使ΔTg
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- 2022-06-13 09:09:42轉(zhuǎn)錄因子控制細胞表面蛋白“組合編碼”
- 細胞核內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子是決定細胞命運、形態(tài)、和生理功能的中心指揮者,而在細胞膜表面的蛋白則通過與細胞環(huán)境的相互作用來執(zhí)行這些指令?!稗D(zhuǎn)錄因子→細胞表面蛋白→生理功能”的框架被認為存在于一切涉及細胞與環(huán)境交流的生物學過程中。例如在發(fā)育的神經(jīng)元中,科學家們常常假設(shè)轉(zhuǎn)錄因子通過調(diào)節(jié)細胞表面蛋白的表達,來控制神經(jīng)元之間連接,形成特定的神經(jīng)環(huán)路。2022年5月24日,來自美國斯坦福大學與霍華德休斯醫(yī)學研究所的知名學者駱利群教授,帶領(lǐng)團隊在Neuron期刊上發(fā)表研究論文,用一個定義譜系的轉(zhuǎn)錄因子Acj6為例子,展示了轉(zhuǎn)錄因子如何“四兩撥千斤”,通過調(diào)節(jié)不同組合的表面蛋白的表達,控制不同神經(jīng)元類型的連接。駱利群實驗室的博士生謝琦婧和李介夫博士為本文的共同***作者。早在2003年,駱利群教授團隊發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄因子Acj6特異性表達在果蠅嗅覺系統(tǒng)投射神經(jīng)元 (projection neuron,PN)的一個譜系(lineage)中,并控制這些神經(jīng)元特異性的樹突靶向。不過,當時由于缺少直接測量特定細胞群體表面蛋白表達的方法,無法進一步知道Acj6以及其他轉(zhuǎn)錄因子如何通過細胞表面的蛋白質(zhì)控制神經(jīng)連接的特異性。直到2020年,駱利群教授、本文的共同***作者李介夫博士與合作者發(fā)展了一種高時空分辨率的蛋白組學技術(shù),在方法上實現(xiàn)了突破。這種技術(shù)使得研究人員可以直接在完整果蠅大腦內(nèi)對指定細胞類型的表面蛋白組進行高精度的生物素標記、富集和分析,也為系統(tǒng)地研究轉(zhuǎn)錄因子如何在多細胞生物的完整組織中塑造細胞表面蛋白質(zhì)組提供了可能?!嚓P(guān)閱讀:駱利群/Alice Ting聯(lián)合團隊《細胞》發(fā)文,創(chuàng)新技術(shù)找到多個神經(jīng)連接調(diào)節(jié)因子在此次新研究中,研究人員運用這種蛋白組學技術(shù),首先找到了轉(zhuǎn)錄因子Acj6調(diào)節(jié)哪些細胞表面蛋白來執(zhí)行它的命令。他們分別在野生態(tài)和acj6功能喪失突變體中,對投射神經(jīng)元進行了表面蛋白組的定量分析,然后基于蛋白組學的數(shù)據(jù)進行體內(nèi)篩選,由此揭示了許多執(zhí)行Acj6連接指示的分子。這些表面蛋白有一些正如作者的猜測,屬于細胞粘附分子,但還有一些則令人意外。比如,機械敏感離子通道Piezo。這種蛋白傳統(tǒng)上被認為只介導(dǎo)神經(jīng)元功能,但他們發(fā)現(xiàn),失去機械敏感離子通道活性的Piezo突變體可以與野生型Piezo一樣精準調(diào)控PN樹突靶向?!斑@個結(jié)果***展示了Piezo獨立于機械感覺離子通道的功能?!弊髡咧赋觥?nbsp;▲在PN中敲除Piezo導(dǎo)致樹突錯誤的靶向(白色箭頭)接下來,為了建立轉(zhuǎn)錄因子Acj6與其調(diào)控的表面蛋白在樹突靶向中的功能性聯(lián)系,研究人員在表達Acj6的投射神經(jīng)元中特異性地敲除了acj6,同時又在這些神經(jīng)元中特異性地表達了Acj6促進表達的表面蛋白。實驗結(jié)果表明,在不同神經(jīng)元類型中,Acj6通過調(diào)控不同組合的表面蛋白表達來指定這類神經(jīng)元特異的靶向?!霸诓煌窠?jīng)元中,一個轉(zhuǎn)錄因子是通過調(diào)節(jié)相同、還是不同的細胞表面蛋白以指定它們的特異連接,這個問題過去并不清楚。”研究人員指出,“發(fā)育神經(jīng)生物學長期存在一種假設(shè),認為神經(jīng)連接的特異性可能是由表面蛋白組合編碼(combinatorial code)控制,現(xiàn)在我們***為這一假設(shè)提供了實驗證據(jù),展示了表面蛋白間的遺傳相互作用模式(加法、減法和協(xié)同)?!薄鳤cj6在不同神經(jīng)元類型中通過調(diào)控不同表面蛋白(cell-surface executor)的表達來控制神經(jīng)連接特異性正如科學家們在論文中提及的那樣,這篇文章為未來研究轉(zhuǎn)錄因子功能與機理提出了一個新的策略和方法的原型。RNA提取磁珠屬于納米生物磁珠的一種,主要作用是用于核酸提取過程中的RNA提取,粒徑分布在500nm左右,是洛陽吉恩特生物自主研發(fā)生產(chǎn)的高分子納米磁性微球,該磁珠懸浮時間長,磁響應(yīng)時間迅速,對DNA甲基化過程中的提取環(huán)節(jié)提供良好的支持,可明顯縮短實驗時間,提高實驗效率,并在提取結(jié)果上保持穩(wěn)定,配合核酸提取儀,更能實現(xiàn)快速的RNA提取。
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- 2023-06-16 14:30:12Spinsights離心洞察第四期-衡量離心效率的關(guān)鍵指標—K因子
- 需要擴大樣品體積或升高轉(zhuǎn)速以提高效率時,離心參數(shù)轉(zhuǎn)換時有發(fā)生。繁瑣的計算復(fù)雜且耗時,貝克曼庫爾特為您提供方便實用的軟件工具及在線解決方案,實現(xiàn)離心參數(shù)無縫轉(zhuǎn)換。簡化方案轉(zhuǎn)換RPM與RCF間的相互轉(zhuǎn)換根據(jù)來源不同,離心方案的描述單位可能是RPM(每分鐘轉(zhuǎn)數(shù))或RCF(相對離心力)—— RCF又稱g-force(xg),一般用來表示最 大半徑(rmax)處的離心力。RCF和RPM可通過轉(zhuǎn)頭半徑進行換算,如需將方案轉(zhuǎn)換至新的離心管/瓶或轉(zhuǎn)頭,還需了解現(xiàn)有離心機及新離心機的更多信息。衡量離心效率的指標—— k 因子從一個轉(zhuǎn)頭(離心管)轉(zhuǎn)換到另一個轉(zhuǎn)頭(離心管),rmin 和 rmax均會改變,而且最 大相對離心力不能體現(xiàn)效率。因為K因子綜合了沉降路徑與相對離心力,所以可以表示沉降效率。同時K因子也能用以計算運行時間,在使用不同轉(zhuǎn)頭、離心管(瓶)、適配器及加樣體積的情況下,都能使方案轉(zhuǎn)換變得簡單輕松。離心專家”替代轉(zhuǎn)頭運行“小程序 適當轉(zhuǎn)換離心方案不僅需要匹配 RPM 或 RCF 值,追蹤轉(zhuǎn)頭及離心管尺寸規(guī)格也是一個繁瑣的過程。Optima XPN超速離心機配備eXpert離心專家軟件,其中的模擬功能可高效進行方案轉(zhuǎn)換。此外,在線轉(zhuǎn)頭計算器同樣可以實現(xiàn)方案轉(zhuǎn)換。小貝學習中心”離心參數(shù)計算器“小結(jié)在新的離心機上使用現(xiàn)有離心方案,必然涉及繁瑣的手工計算。貝克曼庫爾特為您提供便捷、快速的轉(zhuǎn)換工具。
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