FuniCut? PspGI限制性內(nèi)切酶(PspGI酶切序列位點(diǎn)↑CCWGG)

FuniCut™系列內(nèi)切酶是通過基因工程重組技術(shù)，可在5～15 min內(nèi)精確完成DNA切割的快速限制性內(nèi)切酶，適用于快速切割質(zhì)粒DNA、PCR產(chǎn)物、基因組DNA等。FuniCut™系列快速內(nèi)切酶共用一種酶切緩沖液，從而簡化了酶切反應(yīng)體系，另外，有良好的酶活冗余度，可輕松處理底物過量或困難模板的酶切。

產(chǎn)品信息

組分信息

*10×FuniCut™ Color Buffer包括紅色和黃色示蹤染料，可將產(chǎn)物直接用于凝膠電泳。FuniCut™ Color Buffer的紅色染料與2500 bp雙鏈DNA片段在1%瓊脂糖凝膠中遷移速率接近；黃色染料與10 bp雙鏈DNA片段在1%瓊脂糖凝膠中遷移速率接近。

儲存條件

-25～-15℃保存，有效期2年。

注意事項(xiàng)

1.3 h孵育未表現(xiàn)星號活性，延時酶切可能出現(xiàn)星號活性。

2.受Dcm甲基化影響，序列完全重疊，剪切阻斷。

3.為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

4.本產(chǎn)品僅作科研用途。

使用方法

1. DNA快速酶切流程

1) 按如下建議的加樣順序配制體系反應(yīng)液（冰上操作）

*本體系指已純化后的PCR產(chǎn)物。未純化的PCR產(chǎn)物具備一定的離子強(qiáng)度，10×FuniCut^TM Buffer加入量可適當(dāng)減少至2 μL。若下一步進(jìn)行克隆等實(shí)驗(yàn)，酶切前需純化PCR產(chǎn)物。

2) 輕柔吸打或輕彈管壁以混勻（切勿渦旋），然后瞬時離心以收集掛壁液滴。

3) 75℃孵育15 min（質(zhì)粒），或15～30 min（PCR產(chǎn)物），或30～60 min（基因組DNA）。

4) 酚氯仿抽提或柱純化（可選）。

5) 如果使用FuniCut™ Color Buffer進(jìn)行酶切反應(yīng)，得到的產(chǎn)物可直接上樣電泳。

2. 雙酶切或多酶切

1) 每種內(nèi)切酶的用量為1 μL，并根據(jù)需要適當(dāng)擴(kuò)大反應(yīng)體系。

2) 所有內(nèi)切酶的體積總和不得超過總反應(yīng)體系的1/10。

3) 如果選用的幾種內(nèi)切酶的最適反應(yīng)溫度不同，應(yīng)先以最適溫度低的酶開始酶切，再添加最適溫度較高的酶，以較高的溫度進(jìn)行孵育。

3. 質(zhì)粒的擴(kuò)大反應(yīng)體系

*如果總反應(yīng)體系大于20 μL，可使用水浴、金屬浴或沙浴，并增加孵育時間。

4. 不同DNA中的識別位點(diǎn)數(shù)

5. 甲基化修飾影響

6. 不同反應(yīng)緩沖液中的活性*

*活性數(shù)據(jù)來自翌圣生物限制酶標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)體系下的檢測。

Ver.CN20230731