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    Endotoxin Removal Agarose Resin,High Performance 內(nèi)毒素高效去除純化樹脂

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    詳細(xì)介紹

    產(chǎn)品簡介

    Endotoxin Removal Agarose Resin是一種用于去除生物源蛋白類產(chǎn)品(包括蛋白、多肽、抗體、多糖等)中內(nèi)毒素的樹脂。其原理是將修飾過的多粘菌素B連接至4%瓊脂糖微球上,進(jìn)行特異性去除內(nèi)毒素,經(jīng)純化可將樣品中內(nèi)毒素降低至0.1 EU/mL,且樣品回收率高。

    翌圣為您提供蛋白純化實(shí)驗(yàn)整體解決方案,相關(guān)產(chǎn)品選購請參考:蛋白純化系列產(chǎn)品-選購指南

     

    產(chǎn)品信息

    貨號

    20518ES10/ 20518ES60/20518ES76

    規(guī)格

    10 mL /100 mL / 500 mL

     

    產(chǎn)品性質(zhì)

    基質(zhì)(Matrix)

    4%瓊脂糖微球

    配體(Ligand)

    修飾過的多粘菌素B

    粒徑(Bead size)

    45-165 µm

    載量(Capacity)

    2000000 EU/mL基質(zhì)

    最大壓力(PressureMax

    0.1 MPa, 1bar

    pH穩(wěn)定范圍(pH range)

    5-10

    儲存緩沖液(Buffer)

    20%乙醇

     

    儲存條件

    2~8℃保存,有效期2年。

     

    需準(zhǔn)備試劑

    所用水和Buffer以及耗材均需無熱原處理,防止在使用過程中引入內(nèi)毒素。

    平衡液20 mM 磷酸鹽,150 mM NaCl,pH7.4

    再生液1% Triton X-114的平衡液

    【注】平衡液和洗脫液可根據(jù)樣品性質(zhì)進(jìn)行改變,建議pH7-8, NaCl約150 mM-500 mM。

     

    使用說明

    【注】a 樣品在上樣前最好用0.22 µm或0.45 µm濾膜過濾,減少雜質(zhì)以防阻塞柱子;

       b 內(nèi)毒素結(jié)合柱子的最佳pH為6-9,因此樣品pH最好控制在7-8;

       c 樣品最好控制在適當(dāng)?shù)碾x子強(qiáng)度,減少非特異吸附,NaCl約150 mM-500 mM。

    樣品純化1 mL樹脂為例

    1)裝柱:充分混勻Endotoxin Removal Agarose Resin,用無熱原槍頭吸取適量漿液加入合適的層析柱中,注意避免產(chǎn)生氣泡,打開下出口去掉保護(hù)液,用3 mL再生液進(jìn)行清洗,控制流速在0.25 mL/min,或<10滴/min,溫度控制在2~8,重復(fù)至少2次,確保柱中無內(nèi)毒素。

    2)平衡:3 mL的平衡液平衡柱管內(nèi)壁及樹脂,流干,流速約0.5 mL/min,溫度控制在2~8,重復(fù)至少兩次。

     3)過柱及檢測將樣品加到平衡好的樹脂中,調(diào)節(jié)流速在0.25 mL/min,或<10滴/min,當(dāng)流出液流出約1 mL 時(shí),開始收集流出液,流干后加入1 mL平衡液繼續(xù)收集。檢測樣品中內(nèi)毒素含量及樣品回收率。

    【注】如果樣品中內(nèi)毒素含量仍高于目標(biāo)值,繼續(xù)重復(fù)1-3。

     

    注意事項(xiàng)

    1.本品可耐受試劑:20%DMSO,20%乙醇,20%甘油;1 M尿素,300 mM咪唑;0.05% Tween 20,10 mM DTT等。

    2.本產(chǎn)品僅作科研用途

    3.為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

     

    附表 問題及解決方案

    問題

    原因分析

    推薦解決方案

    內(nèi)毒素去除效率低

    樣品pH值不在內(nèi)毒素結(jié)合范圍內(nèi)

    0.1 M NaOH或0.1 M HCl調(diào)節(jié)至pH7-8

    樣品與樹脂接觸時(shí)間短

    減少流速,增加樣品接觸時(shí)間

    去除或檢測系統(tǒng)被內(nèi)毒素污染

    所有試驗(yàn)用品均需無熱源產(chǎn)品

    內(nèi)毒素與目的蛋白結(jié)合較強(qiáng)

    優(yōu)化樣品pH,使樣品與內(nèi)毒素分離

    增加接觸時(shí)間

    樣品被污染

    樹脂純化過其他樣品

    不用使用過的樹脂去除不同樣品內(nèi)毒素

    樣品回收率低

    樣品非特異性吸附在樹脂上

    增加樣品和平衡液的NaCl濃度

    目的蛋白與內(nèi)毒素結(jié)合一起被去除

    優(yōu)化樣品pH,使樣品與內(nèi)毒素分離

     

    Ver.CN20230719

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