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    Streptavidin(SAV) MagBeads 鏈霉親和素(SAV)免疫磁珠

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    詳細(xì)介紹

    產(chǎn)品簡介

     

    鏈霉親和素(streptavidin)是一種來源于阿維丁鏈霉菌由四個相同亞基組成的生物素結(jié)合蛋白質(zhì),每個亞基均有一個與生物素有高親和力的結(jié)合位點。生物學(xué)上常將鏈霉親和素包被在磁珠上,借助鏈霉親和素-生物素高親和力結(jié)合特性,結(jié)合生物素化蛋白、多肽、及非蛋白質(zhì)(如各種DNA、RNA分子)等分子,進而從混合體系中快速分離生物素化成分,進行如親和純化,細(xì)胞分離,DNA探針分析和mRNA分離等多方面應(yīng)用。

    翌圣streptavidin(SAV)MagBeads是將鏈霉親和素(streptavidin)通過化學(xué)方法固定在聚合物磁性微球上,應(yīng)用生物素與鏈霉親和素之間的相互作用來實現(xiàn)固定化生物素或生物化的蛋白、抗體等物質(zhì)的目的。

    翌圣為您提供蛋白純化實驗整體解決方案,相關(guān)產(chǎn)品選購請參考:蛋白純化系列產(chǎn)品-選購指南

     

    產(chǎn)品信息

     

    貨號

    47503ES03 / 47503ES08

    規(guī)格

    1 mL /5×1 mL

     

    產(chǎn)品性質(zhì)

     

    基質(zhì)(Matrix  spherical

    聚合物磁性微球

    配體(Ligand)

    鏈霉親和素

    結(jié)合能力(Binding Capacity

    20 µg biotinylated IgG /mg磁珠

    徑(Particle size)

    1 µm

    磁珠濃度Concentration

    10 mg/mL

    儲存緩沖液(Storage Buffer)

    PBS, 0.01% Tween-20, 0.02% NaN3

     

    儲存條件

     

    2~8℃保存,有效期2年。

     

    使用說明

     

    一、磁珠準(zhǔn)備

    1. Streptavidin (SAV) MagBeads顛倒或漩渦混合均勻。
    2. 100 μL Streptavidin (SAV) MagBeads加入新的離心管中。放置在磁分離器上,待溶液變澄清后,用移液器吸棄保護液。
    3. 將離心管從磁分離器上取下來,加入500 μL清洗緩沖液,混勻,放置在磁分離器上,收集磁珠,用移液器吸棄保護液。重復(fù)洗2次。

    推薦清洗緩沖液:

    核酸樣品:TES緩沖液,  抗體/蛋白樣品:PBS緩沖液, pH7.4

    二、生物素化分子固定

    1. 需要準(zhǔn)備的試劑

    生物素化樣品平衡/洗雜液:

    核酸樣品:TES緩沖液,  抗體/蛋白樣品:PBS緩沖液, pH7.4

     

        2.操作流程

    a.  加入100 μL平衡液(2.1)將磁珠懸浮。

    b.  加入適量生物素化樣品溶液,充分混勻。

    c.  室溫孵育1h以上(具體時間根據(jù)結(jié)合效果調(diào)整),可以振蕩或漩渦混合均勻。

    d.  將離心管置于磁分離器上,待磁珠全部吸附后,吸棄上清液。如有需要可留做進一步檢測。

    e.  加入1 mL洗雜液2.1混合均勻,置于磁分離器上,待磁珠全部吸附后,吸棄上清液。重復(fù)洗雜至少3次。

    f.  用下游實驗用的溶液,將固定好生物素化分子的磁珠重新懸浮至合適濃度,以備后續(xù)使用。下面以固定抗體后純化抗原為例

    三、抗原的純化

    1. 試劑準(zhǔn)備

    生物素化抗體

    平衡液/洗雜液:PBS緩沖液, pH7.4

    洗脫液:0.1 M Glycine-HCl, pH 2.5-2.8

    中和液:1M Tris-HCl, pH 8.5

    1. 純化流程
    1. 100 μL的磁珠(步驟2中已經(jīng)固定好生物素抗體的磁珠)加入離心管,置于磁分離器上,待磁珠全部吸附后,吸棄上清液。
    2. 加入1mL平衡液(3.1)混合均勻,置于磁分離器上,待磁珠全部吸附后,吸棄上清液。重復(fù)洗雜至少3次。
    3. 向上一步準(zhǔn)備好的磁珠中,加入抗原樣品輕輕的混合均勻,體積不足200 μL用抗原溶液補足。室溫孵育30 min以上或者4℃過夜,確保磁珠充分懸浮以免影響吸附效果。
    4. 加入1mL洗雜液(3.1)混合均勻,置于磁分離器上,待磁珠全部吸附后,吸棄上清液。重復(fù)洗雜至少3次。
    5. 加入300-500 μL洗脫液(3.1)混合均勻,室溫孵育5 min。
    6. 將離心管置于磁分離器上,待磁珠全部吸附后,吸取含抗原樣品的上清液。如有需要可留做進一步檢測。
    7. 加入洗脫體積十分之一的中和液中和。100 μL洗脫液中加入10 μL中和液中和。
    8. 如有需要可重復(fù)步驟e-g兩次,增加洗脫效率。

     

    注意事項

     

    1. 免疫磁珠易沉降聚集,因此產(chǎn)品使用前要劇烈振蕩或超聲處理。
    2. 本產(chǎn)品僅作科研用途。
    3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

     

    Ver.CN20231108

     

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