德國徠卡 共聚焦顯微鏡 STELLARIS平臺上的STED 顯微鏡

我們的受激發(fā)射損耗（STED）技術(shù)與STELLARIS共聚焦平臺相結(jié)合，為您提供超越衍射極限的快速成像方法。以令人驚嘆的圖像質(zhì)量和分辨率迅速獲得先進(jìn)的納米顯微成像，同時還保護(hù)您的樣本。STED超高分辨率顯微技術(shù)允許您同時研究多個動態(tài)事件，因此您可以在細(xì)胞環(huán)境中探索分子關(guān)系和機(jī)制。

STED和STELLARIS平臺無縫集成，您可以直接通過共聚焦界面輕松使用 STED。只需點擊幾下，您就可以從樣本中獲得更豐富的信息，因為每一個細(xì)節(jié)都很重要。

TauSTED Xtend：銳利。簡單。驚艷。

TauSTED Xtend代表了STED成像技術(shù)的下一步演進(jìn)。它將基于壽命的信息與額外的空間信息相結(jié)合， 可顯著提高分辨率，尤其是在較低的STED損耗光強下，因而能在令人矚目的納米尺度上擴(kuò)展多色實時成像能力。

能力

在納米尺度上解析結(jié)構(gòu)中的更小細(xì)節(jié)。以更高的分辨率進(jìn)行更長時間的實時成像。

潛力

使用標(biāo)準(zhǔn)熒光團(tuán)，按照您喜歡的STED實驗方法進(jìn)行操作。即使使用單條STED激光譜線，也可進(jìn)行擴(kuò)展多色成像。

生產(chǎn)力

直接以納米尺度的分辨率監(jiān)測快速過程。在實驗進(jìn)行中即時獲得關(guān)于結(jié)果的反饋。

以令人矚目的納米尺度進(jìn)行溫和的多色實時成像

活體樣本內(nèi)的動態(tài)成像仍然是富有挑戰(zhàn)性的實驗方法。為了獲得科學(xué)相關(guān)結(jié)果，根據(jù)樣本和熒光團(tuán)的不同，照明需要足夠低，以避免光漂白和光毒性。

得益于STELLARIS平臺，包括最 新一代白光激光器（WLL）、Power HyD檢測器和熒光壽命技術(shù)（TauSense，F(xiàn)ALCON），多色實時成像和功能成像實驗已成為共聚焦成像的常規(guī)方法。

有了TauSTED Xtend，您可以顯著降低激發(fā)光和STED光的劑量，這樣您就能長時間研究生物過程，即使在納米級別下也不例外。

在納米尺度上解析樣本中的更小細(xì)節(jié)

您是否正在尋找超高分辨率策略，以便在時間和空間上跟蹤感興趣的生物目標(biāo)，同時將外部擾動降至最 低？

與標(biāo)準(zhǔn)共聚焦成像以及傳統(tǒng)gated STED方法相比，TauSTED顯著提高了分辨率，從而大大降低了激發(fā)光和STED光的劑量。

TauSTED Xtend進(jìn)一步提高了可達(dá)到的最 大分辨率，即使在STED損耗光強較低時也能顯示明確的信號。

[Translate to chinese:] TauSTED Xtend reveals the distribution of nuclear pores (NPCs) on COS7 cells immunostained for NUP complexes with AF 488. Only 0.5% of STED light reveals much more detail.

使分辨率超越傳統(tǒng)極限

TauSTED可測量每個STED實驗中采集的基于熒光壽命的信息，并實時測定熒光團(tuán)的STED響應(yīng)。無論您使用哪種激發(fā)光和STED譜線（589、660、775），這些信息都能讓您提高圖像質(zhì)量（信噪比），利用物理原理消除背景中的光子，使分辨率超越基于強度的STED。

TauSTED Xtend代表了STED成像技術(shù)的下一步演進(jìn)，將基于壽命的信息與額外的空間信息相結(jié)合。您會看到分辨率顯著提升，尤其是在較低的STED損耗光強下，因而能在令人矚目的納米尺度上擴(kuò)展實時成像能力。

STED 和 DNA 折紙術(shù)成像：TauSTED 775 對標(biāo)稱尺寸為23納米的 GATTA-Bead R 的解析分辨率小于30納米。比例尺：1微米。

使用您的標(biāo)準(zhǔn)實驗方案

您是否希望使用熟悉的實驗方案以及生命科學(xué)研究中常用的各種熒光標(biāo)簽和標(biāo)記物，將實驗縮小到納米尺度？

TauSTED Xtend為使用綠色熒光蛋白和熒光團(tuán)的單色和多色實驗提供了新的機(jī)會，綠色熒光蛋白和熒光團(tuán)是生命科學(xué)研究中的強大工具，目前在納米級研究中使用不多。

即使使用單條STED激光譜線，您也可以擴(kuò)大熒光團(tuán)選擇范圍，充分利用STELLARIS的獨特光譜能力。

增加在納米級別上可同時研究的目標(biāo)數(shù)量

多色熒光標(biāo)記能夠揭示細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)之間的關(guān)系，因為您可以對具有分子特異性的不同組分成像。

STED 和 STELLARIS 特別適合多色應(yīng)用。您可以使用光譜紅光區(qū)域的優(yōu)選染料、綠光區(qū)域熒光蛋白、橙光區(qū)域的新型熒光探針。您可以進(jìn)行多種熒光共定位研究，并以亞衍射的細(xì)節(jié)分辨它們。

我們的光譜檢測技術(shù)可提供多達(dá)5個支持 STED 的 Power HyD 探測器，可讓您增加需要在時間和空間上定位的目標(biāo)的數(shù)量。此外，Power HyD檢測器的數(shù)字化功能、速度以及1.5納秒全系統(tǒng)死區(qū)時間，保證了在信噪比和背景方面獲得出色的圖像質(zhì)量，同時與擴(kuò)增光子探測器（APDs）相比，每像素停留時間的光子收集量至少增加10倍。

STED 在發(fā)育生物學(xué)中的應(yīng)用：果蠅胚胎全標(biāo)本制備中RNA的smFISH*。探針被直接標(biāo)記，信號未放大。上圖：三色TauSTED 775可獲得hb CalFluor 610（青色）、gt Quasar 670（綠色）和eve Quasar 705（紫色）的信號。下圖：整個果蠅胚胎的共聚焦成像。樣本由英國曼徹斯特大學(xué)的 Tom Pettini 提供。
*單分子原位雜交

通過熒光壽命分離擴(kuò)展多色STED能力

在STELLARIS 上結(jié)合STED和FALCON模式，您可以進(jìn)一步拓寬熒光團(tuán)的色譜，以納米級分辨率研究分子間的相互作用，因為可以通過它們的熒光壽命來進(jìn)行區(qū)分。

這些熒光團(tuán)的發(fā)射光譜無法通過傳統(tǒng)的強度采集方法進(jìn)行區(qū)分。STED-FLIM與我們的自動相量分離技術(shù)相結(jié)合，可通過這些熒光團(tuán)獨有的壽命和單個檢測器清楚地將它們分離。

STED Separation 在細(xì)胞生物學(xué)中的應(yīng)用：STED 775和FALCON STED Separation 技術(shù)可以利用不同熒光的壽命來分離具有重疊光譜的熒光樣本。在標(biāo)記了TOM20和微管蛋白的U2OS細(xì)胞中，單純的光子計數(shù)強度信息（灰色）顯示兩種結(jié)構(gòu)沒有區(qū)別，而STED-FLIM（青色，AF 647- 微管蛋白；品紅色，ATTO 647N-TOM20）可以明顯區(qū)分它們。

在時間和空間上動態(tài)監(jiān)控實驗結(jié)果

以納米級分辨率在時間和空間維度實時觀察實驗中發(fā)生的情況。使用TauSTED Xtend，您可以即時評估快速過程并在進(jìn)行實驗時即時接收反饋結(jié)果。

一鍵式光束自動對準(zhǔn)，保護(hù)您的樣本免受過度光照，全自動匹配染料理想的激發(fā)波長，確保STED 的高性能。

使用 LAS X Navigator 對大面積區(qū)域快速成像，并選擇您感興趣的區(qū)域進(jìn)行 STED 成像。

借助STELLARIS的能力，例如訪問原始數(shù)據(jù)（真實情況）和快速高效進(jìn)行光子計數(shù)，可驗證您的結(jié)果。

具有出色亮度和分辨率的2D和3D STED 成像

使用STELLARIS STED顯微鏡，您在2D和3D圖像中都可以獲得所需的結(jié)果，因為分辨率可在x、y和z軸上調(diào)節(jié)。為了確保在2D和3D中獲得最 佳的亮度和分辨率，我們的顯微鏡提供了優(yōu)化過的光學(xué)設(shè)備，以確保整個光譜中激發(fā)和STED PSF的最 優(yōu)重疊，以及由于自適應(yīng)校正而不會喪失定量能力。

我們專門開發(fā)了下列STED WHITE系列物鏡，確保為各種STED實驗提供優(yōu)化條件：

• STED WHITE 100x油鏡的分辨率最 高，為日常固定樣本的成像提供了出色的性能。

• STED WHITE 93x甘油物鏡采用motCORR全電動校正環(huán)技術(shù)，在深入樣本觀察時為溫度波動、折射率不匹配和不均勻性提供自適應(yīng)校正。

• 使用motCORR的STED WHITE 86x水介質(zhì)物鏡也可進(jìn)行自適應(yīng)校正（如前所述），非常適合溫和的活細(xì)胞應(yīng)用以及 STED-FCS(1)。

(1) 《High photon count rates improve the quality of super-resolution fluorescence fluctuation spectroscopy》，作者 F. Schneider 等。J. Phys. D: Appl. Phys. 53 164003, 2020。

STED 和 DNA 折紙術(shù)成像：TauSTED 775 對標(biāo)稱尺寸為23納米的 GATTA-Bead R 的解析分辨率小于30納米。比例尺：1微米。